MTT細(xì)胞(bāo)活(huó)性(xìng)檢測服務

四(sì)甲(jiǎ)基(jī)偶氮唑鹽比(bǐ)色(sè)法(fǎ)（MTT方(fāng)法），是通(tōng)過(guò)快速簡(jiǎn)便的顏色反(fǎn)應來(lái)檢測細胞存活數量(liáng)。其(qí)原(yuán)理(lǐ)是MTT可(kě)作為哺(bǔ)乳類(lèi)動物細(xì)胞(bāo)綫(xiàn)粒(lì)體中(zhōng)琥珀(pò)酸(suān)脫(tuō)氫酶的(dí)底物(wù)。當有活(huó)細胞(bāo)存(cún)在時(shí)，綫(xiàn)粒(lì)體內(nèi)琥珀(pò)酸脫氫(qīng)酶可(kě)將淡黃(huáng)色(sè)的(dí)MTT還(huán)原成藍紫(zǐ)色的針狀甲(jiǎ)月替（Formazan）結晶(jīng)並(bìng)沉(chén)積在細(xì)胞中，結晶物(wù)能被(bèi)二甲基亞碸(fēng) （DMSO）溶(róng)解,用(yòng)酶聯免(miǎn)疫(yì)檢測儀在570nm波長(cháng)處測定其吸(xī)光(guāng)度(dù)OD值，OD值的(dí)高(gāo)低可間接反(fǎn)映活細胞(bāo)的數(shù)量及其活性(xìng)。

MTT法常用的研究(jiū)：

1，檢測細(xì)胞(bāo)活性：常(cháng)作為(wéi)細(xì)胞毒性(xìng)試驗的(dí)一種(zhǒng)方(fāng)法。

2，體外藥物敏感(gǎn)實(shí)驗：該方法簡(jiǎn)便，經(jīng)濟，快(kuài)速(sù)，重復性(xìng)好，所(suǒ)需的細胞數較(jiào)少，沒有(yǒu)放(fàng)射(shè)性，目(mù)前廣泛(fàn)的(dí)用於臨(lín)床前(qián)的抗癌(ái)藥物的篩選研(yán)究(jiū)。

3，一(yī)些細胞因子活性的研(yán)究(jiū)

實驗步驟:

1）將對數生(shēng)長(cháng)期(qī)細胞用胰酶(méi)消(xiāo)化(huà)後(hòu)配製(zhì)成濃(nóng)度為(wéi)1-10×104個/ml的(dí)細胞(bāo)懸(xuán)液，按(àn)1000-10000個細胞(bāo)/孔接種(zhǒng)於(yú)96孔板，每(měi)孔加(jiā)100μl。

2）將(jiāng)平(píng)板(bǎn)置37℃， 5%CO2濕(shī)度(dù)培(péi)養箱中(zhōng)24小(xiǎo)時(shí)後，加(jiā)入(rù)含(hán)有不同(tóng)濃(nóng)度(dù)受試(shì)樣本的培(péi)養(yǎng)液100μl，每(měi)個(gè)樣(yàng)本(běn)不同(tóng)濃度(dù)設平行的三個孔，對照組加不含樣本(běn)的培養(yǎng)液(yè)100μl，再放入(rù)培(péi)養(yǎng)箱中孵育(yù)24-72 小時，

3）用(yòng)快(kuài)速(sù)翻板(bǎn)法(fǎ)倒掉培養液，每孔加(jiā)入(rù)用無血(xiě)清(qīng)1640按(àn)5mg/ml新鮮(xiān)配(pèi)製(zhì)的(dí)MTT溶液100μl，溫育(yù)4小時，使(shǐ)MTT還原(yuán)為甲 月替，再(zài)次倒掉(diào)上(shàng)清液(yè)，每孔加(jiā)DMSO（二甲基亞楓(fēng)）200μl，用平板(bǎn)搖(yáo)床(chuáng)搖匀後(hòu)，使用(yòng)酶(méi)標儀測定光密(mì)度(dù)值(zhí)（OD）（參考波長450nm，檢(jiǎn)測(cè)波長(cháng)570nm），以(yǐ)溶劑對照處理(lǐ)細(xì)胞(bāo)為對照組，按(àn)下(xià)述公式(shì)計算化合物對細(xì)胞的(dí)抑(yì)製(zhì)率，並按中(zhōng)效方程(chéng)計(jì)算半(bàn)數(shù)抑製濃(nóng)度IC50：

客(kè)戶方(fāng)需(xū)提供:

樣(yàng)本(běn)描述(shù),相關(guān)的(dí)實(shí)驗(yàn)設計(jì)內(nèi)容(róng)如作(zuò)用時間(jiān)和樣本(běn)濃(nóng)度(dù)等(děng)。

公司方(fāng)提供(gōng)：

實(shí)驗結果(guǒ)IC50值。

實驗(yàn)周期與費用：

實驗(yàn)費(fèi)用(yòng)以樣(yàng)本數和細胞株(zhū)的種(zhǒng)類(lèi)數目為單位(wèi)計算(suàn)，實(shí)驗周期為18個(gè)工作日，公司(sī)將在(zài)材(cái)料和(hé)預付(fù)的實驗(yàn)經費(fèi)全(quán)部到位後(hòu)25個(gè)工作日之內提(tí)交實驗結(jié)果(guǒ)。客戶需在收到實(shí)驗結果後(hòu)一(yī)周(zhōu)內付清所(suǒ)有(yǒu)剩(shèng)餘(yú)款(kuǎn)項。