基(jī)因(yīn)組(zǔ)DNA抽(chōu)提:

    通過基因組(zǔ)DNA抽(chōu)提試劑盒(hé)可(kě)以抽提(tí)動(dòng)物(wù)組織，鼠尾(wěi)，培(péi)養細(xì)胞，細菌，酵母(mǔ)，動(dòng)物(wù)血液(yè)，昆(kūn)蟲以及(jí)固定(dìng)組織(zhī)的包(bāo)括基因組(zǔ)DNA在(zài)內(nèi)的(dí)總DNA。通過試劑(jì)盒(hé)說明書中提(tí)供(gōng)的不(bù)同操(cāo)作(zuò)方法，可以(yǐ)抽提(tí)除植(zhí)物樣品外(wài)的(dí)幾乎(hū)所有樣品中的(dí)總DNA。

步驟：
    樣(yàng)品首(shǒu)先被蛋(dàn)白(bái)酶K消化，隨後加(jiā)入(rù)適合(hé)DNA結合(hé)到(dào)純(chún)化(huà)柱上的(dí)緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)，然後加(jiā)入(rù)到純(chún)化柱內(nèi)。通過(guò)高速(sù)離(lí)心(xīn)，使(shǐ)DNA在(zài)穿過純化(huà)柱的(dí)瞬間(jiān)，結合到(dào)純化柱上，隨(suí)後(hòu)通過兩次洗(xǐ)滌(dí)去(qù)除各(gè)種雜(zá)質，zui後通(tōng)過洗(xǐ)脫(tuō)液(yè)把DNA洗脫(tuō)下來。整(zhěng)個(gè)過程無(wú)需酚氯仿(fǎng)抽(chōu)提，無(wú)需酒(jiǔ)精沉(chén)澱(diàn)，樣(yàng)品裂(liè)解後(hòu)僅需(xū)約(yuē)15分鐘即可完成。

效率：
   1. 通過(guò)試劑盒(hé)純化得到的(dí)基(jī)因(yīn)組DNA的長度zui長可(kě)達50kb左右，平均(jūn)為30kb左(zuǒ)右，zui短為100bp的(dí)DNA也可以被(bèi)純(chún)化。如需獲(huò)得(dé)更長的基因(yīn)組(zǔ)DNA，對(duì)於哺乳(rǔ)動(dòng)物(wù)樣(yàng)品，包(bāo)括組織或(huò)細(xì)胞等，可以使(shǐ)用特(tè)定(dìng)的試劑盒抽(chōu)提(tí)。
    2.通過(guò)試劑盒獲得的總DNA，OD260/OD280的範(fàn)圍(wéi)通(tōng)常(cháng)在(zài)1.7至1.9之間(jiān)。
    3.試(shì)劑盒可(kě)以抽提(tí)少至數(shù)百個(gè)細(xì)胞，多(duō)至(zhì)25mg組織，0.5-1cm鼠(shǔ)尾(wěi)，500萬(wàn)個培養細胞(bāo)，20億個(gè)細菌或5000萬個酵(jiào)母。

     4.樣品用(yòng)量(liáng)過多，反而(ér)會(huì)影響(xiǎng)抽提(tí)效(xiào)果。如果(guǒ)待抽提(tí)樣品的(dí)DNA含(hán)量(liáng)小(xiǎo)於5ng，建議加(jiā)入(rù)適當(dāng)量的(dí)carrier DNA，例如poly-dT或其(qí)它對後(hòu)續(xù)實(shí)驗沒有幹擾的DNA，也可(kě)以(yǐ)加入適當(dāng)量(liáng)的carrier RNA，例如yeast RNA等(děng)，以改善(shàn)抽提(tí)效果(guǒ)。
    5.試劑(jì)盒(hé)的標(biāo)準(zhǔn)操(cāo)作步驟抽提(tí)得到的(dí)總(zǒng)DNA會(huì)含(hán)有少量RNA，但如果按照(zhào)一(yī)般的(dí)試劑盒(hé)可(kě)選步(bù)驟(zhòu)加(jiā)入RNase A，就可以(yǐ)獲(huò)得(dé)不含RNA的高(gāo)純(chún)度(dù)總(zǒng)DNA。含(hán)有RNA的總DNA可(kě)以用於PCR，但(dàn)對(duì)於(yú)某些(xiē)其(qí)它的後(hòu)續反應(yīng)可能會(huì)產(chǎn)生一些影(yǐng)響(xiǎng)。

 DNA抽(chōu)提(tí)時樣(yàng)本(běn)抽(chōu)提(tí)的範(fàn)圍：  

    純化柱對於(yú)DNA的(dí)zui大容量(liáng)約(yuē)為30微(wēi)克。通(tōng)常(cháng)每200萬(wàn)Hela細胞或500萬淋巴細胞(bāo)可以抽(chōu)提(tí)得(dé)到(dào)15-25微(wēi)克(kè)總DNA，每(měi)25mg肝，腦，腎(shèn)組織可(kě)以(yǐ)抽提得到(dào)10-30微克(kè)總(zǒng)DNA，每(měi)25毫(háo)克(kè)心，肺(fèi)組織可以(yǐ)抽(chōu)提(tí)得到5-10微克總DNA，每10mg脾組(zǔ)織(zhī)可以抽(chōu)提得(dé)到(dào)5-30微克(kè)總DNA，每1.2cm小鼠(shǔ)尾(wěi)尖或0.3cm大(dà)鼠(shǔ)尾(wěi)尖(jiān)可以獲得10-25微克(kè)總(zǒng)DNA。
    
DNA抽(chōu)提(tí)小量試劑盒(hé)包裝清單(dān)：

保(bǎo)存(cún)條件：
    蛋白酶(méi)K-20℃保(bǎo)存，其餘(yú)均室(shì)溫保存(cún)。一年(nián)有效。蛋白酶(méi)K室溫（15-25℃）存放(fàng)一周(zhōu)，活力無明顯下降。

DNA抽提(tí)注(zhù)意事(shì)項(xiàng)：
    1.抽提細菌，酵母樣品(pǐn)時(shí)還需要(yào)一(yī)些特定的(dí)試劑，詳(xiáng)情(qíng)請參(cān)考相關(guān)實(shí)驗步驟(zhòu)。
    2.如(rú)需(xū)製備不(bù)含RNA的高純(chún)度(dù)總DNA，需自備(bèi)RNase A。
    3.溫(wēn)度較低(dī)時(shí)樣品裂(liè)解液A或(huò)樣品裂解(jiě)液(yè)B中(zhōng)可能(néng)會有(yǒu)沉澱產(chǎn)生(shēng)，屬正常現(xiàn)象。使(shǐ)用前必(bì)須(xū)檢(jiǎn)查一遍。如有(yǒu)沉澱，55℃水浴(yù)孵育使(shǐ)沉(chén)澱溶(róng)解，混(hùn)匀後使(shǐ)用。
   4.*次使用(yòng)前洗(xǐ)滌液I需(xū)添(tiān)加7ml無水乙醇(chún)，洗滌(dí)液II需添(tiān)加(jiā)24ml無(wú)水(shuǐ)乙醇(chún)，混(hùn)匀，並在(zài)瓶(píng)上做(zuò)好標記(jì)。
    5.試劑(jì)盒需(xū)使用55℃水浴，請提(tí)前作好(hǎo)準(zhǔn)備(bèi)。
    6.除(chú)特別(bié)說(shuō)明(míng)外，每次Vortex應控製在5-10秒(miǎo)左右。
    7.試(shì)劑盒(hé)所(suǒ)有(yǒu)操作(zuò)均在室溫進行(háng)，操(cāo)作時(shí)無需(xū)冰(bīng)浴(yù)。所有(yǒu)離心也(yě)均(jūn)在(zài)室(shì)溫進(jìn)行。
    8.廢(fèi)液收集(jí)管(guǎn)在一(yī)次(cì)抽(chōu)提(tí)中(zhōng)需(xū)多次(cì)使(shǐ)用，切(qiē)勿中(zhōng)途(tú)丟(diū)棄。
    9.參(cān)考(kǎo)使(shǐ)用說明(míng)，從某些樣品(pǐn)中(zhōng)抽提(tí)總DNA不需(xū)要使用樣(yàng)品(pǐn)裂解液(yè)A。 
    10.為(wéi)了(liǎo)您的(dí)安全和健康，請穿(chuān)實(shí)驗(yàn)服並戴一次性(xìng)手套(tào)操作。