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質粒DNA抽提

簡(jiǎn)要(yào)描(miáo)述:質粒(lì)DNA抽提(tí)通常(cháng)是指(zhǐ)從(cóng)大腸(cháng)杆菌(jūn)中進行小(xiǎo)量質粒(lì)的快(kuài)速(sù)抽提的方法,通(tōng)過試(shì)劑(jì)盒(hé)采用新(xīn)型的離子交(jiāo)換(huàn)柱(zhù),在(zài)特定(dìng)條(tiáo)件下,使質粒能(néng)在離(lí)心(xīn)過(guò)柱(zhù)的瞬間(jiān),結(jié)合到質(zhì)粒(lì)純化(huà)柱上(shàng),在一(yī)定條件下(xià)又能將質(zhì)粒(lì)充(chōng)分洗(xǐ)脫,從(cóng)而(ér)實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒的快(kuài)速純化。無需酚氯仿(fǎng)抽提,無需酒精(jīng)沉(chén)澱,12個(gè)樣品隻(zhī)需(xū)不足(zú)30分(fēn)鐘即(jí)可完成(chéng)。

  • 產品型(xíng)號:
  • 廠商性質(zhì):生(shēng)產廠(chǎng)家
  • 更新(xīn)時間(jiān):2024-05-13
  • 訪(fǎng)  問  量(liáng):6257

質粒DNA抽提:

    通常是(shì)指(zhǐ)從大腸杆菌中進行(háng)小(xiǎo)量質粒的(dí)快速抽(chōu)提(tí)的方法,通過試劑(jì)盒(hé)采(cǎi)用(yòng)新(xīn)型(xíng)的(dí)離子交換(huàn)柱,在特定(dìng)條(tiáo)件(jiàn)下(xià),使(shǐ)質粒能在(zài)離(lí)心過柱的瞬間,結(jié)合(hé)到(dào)質(zhì)粒純(chún)化柱(zhù)上(shàng),在(zài)一(yī)定(dìng)條件(jiàn)下又(yòu)能將質粒(lì)充分洗脫(tuō),從而實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒的快(kuài)速純化。無需(xū)酚(fēn)氯(lǜ)仿(fǎng)抽(chōu)提,無需(xū)酒(jiǔ)精(jīng)沉澱(diàn),12個(gè)樣品(pǐn)隻(zhī)需不(bù)足30分(fēn)鐘(zhōng)即可完(wán)成。

質(zhì)粒(lì)DNA抽(chōu)提(tí)效(xiào)率:
    1.每個質(zhì)粒純化(huà)柱可以(yǐ)結(jié)合的(dí)質粒量(liáng)的上限約(yuē)為(wéi)20微克。

    2.每(měi)個(gè)純(chún)化柱可用於抽提(tí)1-5毫升(shēng)用(yòng)LB培(péi)養(yǎng)的大腸杆(gān)菌(jūn)。

    3.抽提(tí)所得質粒的(dí)OD值(zhí)一(yī)般(bān)在1.80左(zuǒ)右。

    4.抽(chōu)提(tí)獲(huò)得的(dí)質(zhì)粒量會(huì)受(shòu)質(zhì)粒拷(kǎo)貝(bèi)數等因素影(yǐng)響。

    5.抽(chōu)提(tí)獲得(dé)的(dí)質粒DNA的OD值(zhí)也會(huì)因(yīn)菌(jūn)種(zhǒng)不同(tóng)等(děng)原因而略(lüè)有波(bō)動。

用(yòng)途:
   質粒(lì)可直(zhí)接用於轉(zhuǎn)染細(xì)胞,DNA測序(xù),PCR,基於(yú)PCR的突變,體(tǐ)外轉錄,轉化(huà)細(xì)菌(jūn),內(nèi)切酶(méi)消(xiāo)化等。


所(suǒ)需(xū)試劑:溶液I(懸浮液(yè)),溶液II(裂解(jiě)液),溶液(yè)III(結合液(yè)),溶(róng)液IV(洗(xǐ)滌液(yè)),溶液V(洗脫液(yè)),RNase A(100mg/ml),質粒純化(huà)柱(zhù),廢液收集(jí)管(guǎn)等(děng)

保(bǎo)存(cún)條(tiáo)件(jiàn):
    室溫(wēn)保存,一年有(yǒu)效。


注意事項: 
    1.*次(cì)使用前把試(shì)劑(jì)盒(hé)提(tí)供的RNase A全部加到溶液I(懸浮(fú)液)中,混(hùn)匀,並(bìng)在(zài)瓶上做好標記(jì)。加(jiā)入RNase A後4℃存放。
    2.*次(cì)使(shǐ)用前(qián)在(zài)每瓶(píng)溶液IV(洗(xǐ)滌液)中加入54ml無(wú)水乙醇,混匀,並(bìng)在瓶上(shàng)做好標(biāo)記。
    3.溫度較低(dī)時,溶液II和溶液III可(kě)能會有沉澱產(chǎn)生。使(shǐ)用(yòng)前必(bì)須(xū)檢查一遍(biàn)。如有(yǒu)沉澱,37℃水浴(yù)加熱溶解(jiě),混匀後使用。溶(róng)液II請(qǐng)勿過分劇(jù)烈混(hùn)匀,否(fǒu)則(zé)會(huì)產(chǎn)生大(dà)量氣泡(pào)。
    4.溶液II使用(yòng)完(wán)後(hòu),一定(dìng)要(yào)蓋(gài)緊瓶蓋(gài),防(fáng)止(zhǐ)被空氣(qì)中(zhōng)二(èr)氧化(huà)碳(tàn)酸(suān)化。
    5.溶液(yè)II有強鹼(jiǎn)性,溶(róng)液(yè)II和溶液(yè)III對人體(tǐ)都(dū)有(yǒu)刺激(jī)性,操(cāo)作時請小心,並注意(yì)適當防護。
    6.所有操(cāo)作均(jūn)在室(shì)溫(wēn)進行(háng),操作時(shí)無需冰浴。所(suǒ)有(yǒu)離心(xīn)也(yě)均(jūn)在(zài)室溫進(jìn)行。
    7.廢(fèi)液(yè)收集管在一次(cì)抽(chōu)提(tí)中需(xū)多(duō)次使(shǐ)用,切(qiē)勿(wù)中途丟棄。
    8.為(wéi)了安全(quán)和健(jiàn)康,請(qǐng)穿(chuān)實(shí)驗(yàn)服並戴(dài)一次性手套操(cāo)作(zuò)。

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