蛋白(bái)酶(méi)抑(yì)製劑技術(shù)原理和(hé)分類(lèi)

     蛋白(bái)酶抑(yì)製(zhì)劑(jì)技術原理(lǐ)和(hé)分類(lèi)
    當(dāng)細(xì)胞(bāo)破(pò)碎(suì)的(dí)時候，蛋(dàn)白水解(jiě)酶(méi)就會被(bèi)釋(shì)放出來或(huò)被(bèi)激活(huó)，使(shǐ)電泳結果復雜化，影響終結果分析(xī)。為了避(bì)免(miǎn)這些(xiē)情(qíng)況(kuàng)的(dí)出現，建(jiàn)議在樣品(pǐn)製備(bèi)時(shí)盡可能在低溫下(xià)進(jìn)行(háng)。此(cǐ)外，許多(duō)蛋白酶在(zài)PH9以上就失(shī)活(huó)了，因此Tris鹼，碳(tàn)酸鈉或(huò)鹼(jiǎn)性(xìng)載(zǎi)體兩性(xìng)電解(jiě)質往(wǎng)往能(néng)抑製(zhì)蛋(dàn)白(bái)水解(jiě)。但是有些蛋白酶在(zài)上述(shù)條(tiáo)件下(xià)仍然保持(chí)著活(huó)性，此(cǐ)時(shí)應當使用(yòng)蛋白酶(méi)抑(yì)製(zhì)劑。因(yīn)此對於我(wǒ)們(mén)想要研究(jiū)的(dí)蛋白來說，選(xuǎn)擇(zé)性和有效(xiào)的抑(yì)製(zhì)這些(xiē)蛋白(bái)酶對於蛋白(bái)純(chún)化(huà)路綫設計來說顯(xiǎn)得尤為(wéi)重(zhòng)要。
    在(zài)與蛋白相(xiāng)關(guān)的檢測(cè)中，首(shǒu)先關(guān)鍵(jiàn)的(dí)一(yī)步(bù)便(biàn)是(shì)蛋白質(zhì)的(dí)提取(qǔ)。蛋白質的(dí)提(tí)取過(guò)程中(zhōng)，蛋白(bái)水解酶就會(huì)被釋放出來或被(bèi)激活，影(yǐng)響終的結果。為了(liǎo)避(bì)免(miǎn)這些(xiē)情(qíng)況的出(chū)現，可以在樣品製(zhì)備時盡可(kě)能(néng)低溫下進行。此外，許多(duō)蛋白(bái)酶在pH9以上就(jiù)失活了，因此Tris-base，碳酸鈉或鹼性(xìng)載(zǎi)體(tǐ)兩性電解(jiě)質往(wǎng)往(wǎng)能抑製(zhì)蛋白水解。但(dàn)是有些蛋白酶(méi)在上述條件下仍然(rán)保持著(zhuó)活性(xìng)，此時(shí)，我(wǒ)們(mén)可以(yǐ)通(tōng)過加(jiā)入各種蛋白酶抑(yì)製(zhì)劑(jì)以防止(zhǐ)蛋白質(zhì)的(dí)降(jiàng)解(jiě)。
    根(gēn)據催(cuī)化中(zhōng)心結(jié)構的(dí)不同(tóng)蛋白(bái)酶(méi)可分(fēn)為以(yǐ)下4類(lèi)：
    1，絲(sī)氨(ān)酸蛋白(bái)酶
    在其活性中(zhōng)心含有絲(sī)氨酸和組(zǔ)氨(ān)酸，如糜(mí)蛋白酶，彈性蛋(dàn)白(bái)酶，血纖維蛋白溶(róng)酶，凝血(xiě)酶，枯草(cǎo)杆菌蛋(dàn)白酶(méi)，胰酶(méi)等。
    2，半(bàn)胱氨(ān)酸蛋白酶（又稱(chēng)硫(liú)醇(chún)或SH蛋(dàn)白酶(méi)）
    在其催化中(zhōng)心(xīn)含有半胱(guāng)氨(ān)酸，如(rú)鈣蛋白(bái)酶(méi)，組(zǔ)織(zhī)蛋(dàn)白(bái)酶(méi)B/C/L，木(mù)瓜(guā)蛋白酶等。
    3，天(tiān)（門(mén)）冬(dōng)氨酸蛋白(bái)酶（羧基蛋(dàn)白酶）
    在其活性中(zhōng)心(xīn)含(hán)有天(tiān)（門(mén)）冬氨酸，如(rú)組(zǔ)織(zhī)蛋白酶(méi)D，木瓜(guā)蛋(dàn)白酶(méi)，腎素(sù)等。
    4，金(jīn)屬蛋白酶
    在(zài)其催(cuī)化中心(xīn)含(hán)有(yǒu)金(jīn)屬離(lí)子，如(rú)氨(ān)基(jī)肽酶，羧(suō)基(jī)蛋白(bái)酶(méi)A/B，嗜熱(rè)菌蛋白酶(méi)等。
    除了蛋白酶(méi)抑製(zhì)劑(jì)以外，在許多研(yán)究過(guò)程中(zhōng)，尤(yóu)其(qí)是(shì)一(yī)些製藥(yào)公司和研(yán)究院(yuàn)所(suǒ)在研究藥理學機(jī)理(lǐ)的時(shí)候(hòu)，需要了(liǎo)解(jiě)蛋(dàn)白(bái)磷(lín)酸(suān)化途(tú)徑，因此(cǐ)一個(gè)重要的步(bù)驟(zhòu)就是準確的觀察一般和(hé)特(tè)異的(dí)磷酸(suān)化(huà)狀態，所(suǒ)以蛋白抽(chōu)提(tí)的(dí)另一個重要保護過(guò)程就(jiù)是對磷酸(suān)化狀態的有效(xiào)保(bǎo)護。