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熒光(guāng)定(dìng)量(liáng)PCR技術

簡要描(miáo)述:熒光定量PCR技術(shù)於1996年(nián)由(yóu)美國Applied Biosystems公(gōng)司推出,由於該(gāi)技(jì)術不(bù)僅(jǐn)實現(xiàn)了PCR從(cóng)定性到(dào)定(dìng)量(liáng)的飛躍,而(ér)且(qiě)與(yǔ)常規PCR相比,它具有特異(yì)性更強,有(yǒu)效解(jiě)決PCR汙染(rǎn)問題,自動化程(chéng)度高(gāo)等(děng)特點,目前(qián)已(yǐ)得到廣泛應用(yòng)

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  • 廠(chǎng)商性質:生(shēng)產(chǎn)廠家
  • 更新(xīn)時間:2024-05-13
  • 訪  問(wèn)  量(liáng):3157

熒(yíng)光定(dìng)量(liáng)PCR技(jì)術TaqMan探針的特性(xìng):

(1)5′端(duān)標(biāo)記(jì)有(yǒu)報(bào)告基(jī)團(Reporter, R),如(rú)FAM,VIC等(děng) 

(2)3′端標(biāo)記(jì)有(yǒu)熒(yíng)光(guāng)淬(cuì)滅(miè)基團(tuán) (Quencher, Q)

(3)探針完整,R所(suǒ)發射(shè)的熒(yíng)光能(néng)量被(bèi)Q基團(tuán)吸收(shōu) ,無熒光(guāng), R與Q分(fēn)開(kāi),發熒(yíng)光(4)Taq酶(méi)有 5′→3′外(wài)切核酸酶(méi)活性,可水(shuǐ)解探針(zhēn)。

熒(yíng)光定(dìng)量PCR技(jì)術(shù)定(dìng)量(liáng)的標準樣品

(1)含(hán)有(yǒu)和(hé)待(dài)測樣品(pǐn)相同(tóng)擴增片段的克隆質(zhì)粒(lì)

(2)含有和(hé)待(dài)測樣(yàng)品相(xiāng)同擴(kuò)增片段的(dí)cDNA

(3)PCR的產(chǎn)物,可分別做係列(liè)稀釋(shì)。

服(fú)務流程:

步驟

客 戶(hù) 提 供

服(fú) 務 內(nèi) 容

基(jī) 屹 提(tí) 供(gōng)

1

新鮮的(dí)且盡量多(duō)的材料;已知(zhī)的全(quán)長(cháng)基因序列;盡可(kě)能詳細(xì)的背(bèi)景資(zī)料(liào):DNA/ RNA來源(yuán),豐度(dù)等(děng)。

DNA/RNA提(tí)取,根據基(jī)因序列設(shè)計(jì)特(tè)異性的(dí)引(yǐn)物和熒(yíng)光探針。

 

2

純(chún)化好(hǎo)的(dí)DNA/RNA(大於(yú)5 ug/樣品);已知的(dí)全長(cháng)基因序(xù)列(liè);盡(jìn)可能(néng)詳(xiáng)細的背景資料:DNA/ RNA來(lái)源,豐度等。

根據基(jī)因序列設計(jì)特異性的引物(wù)和熒光探(tàn)針。

 

3

 

以(yǐ)DNA為模板,對目的基(jī)因(yīn)進行(háng)熒光(guāng)定量(liáng)PCR檢(jiǎn)測(cè)分析

提供(gōng)完整(zhěng)的(dí)定(dìng)量分析結(jié)果(guǒ),實驗熒光定量(liáng)擴增曲綫及詳(xiáng)細的(dí)實驗(yàn)步驟(zhòu)。

注意:客戶(hù)可(kě)根(gēn)據所能提供(gōng)的(dí)起始(shǐ)材(cái)料(liào)不同,選(xuǎn)擇(zé)從(cóng)步驟1或2啟(qǐ)動(dòng)項目(mù)。

 

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