熒(yíng)光定量PCR技術(shù)服(fú)務(wù)SYBR Green特(tè)性(xìng)：

（1）隻(zhī)有和雙鏈DNA結合(hé)後(hòu)才發(fā)熒光。

（2）變(biàn)性時，DNA雙(shuāng)鏈分開，無熒光。

（3）在延伸(shēn)結(jié)束(shù)階(jiē)段采集熒(yíng)光(guāng)信(xìn)號。

（4）SYBR Green也能和非特異(yì)性(xìng)的(dí)雙(shuāng)鏈(liàn)DNA結(jié)合(hé)發光(guāng)，所以必須在反(fǎn)應結束時做熔解(jiě)曲綫分析。 

熒(yíng)光(guāng)定量PCR技(jì)術服務PCR技術(shù)於1996年由美國Applied Biosystems公司(sī)推(tuī)出，由(yóu)於該技(jì)術不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從(cóng)定(dìng)性(xìng)到定(dìng)量(liáng)的(dí)飛(fēi)躍，而(ér)且(qiě)與(yǔ)常(cháng)規(guī)PCR相比(bǐ)，它(tā)具有特異性(xìng)更強，有效(xiào)解決PCR汙(wū)染(rǎn)問題，自(zì)動化(huà)程(chéng)度高等(děng)特點，目前已(yǐ)得到廣泛應用。 

TaqMan探針的特性：

（1）5′端(duān)標(biāo)記(jì)有報告基(jī)團(tuán)（Reporter, R），如FAM，VIC等(děng) 

（2）3′端(duān)標記有熒光(guāng)淬滅基(jī)團 （Quencher, Q）

（3）探(tàn)針完整，R所發(fā)射的(dí)熒光能量被(bèi)Q基(jī)團吸(xī)收 ，無熒光(guāng)， R與(yǔ)Q分(fēn)開，發熒(yíng)光（4）Taq酶有(yǒu) 5′→3′外(wài)切(qiē)核(hé)酸(suān)酶活(huó)性(xìng)，可(kě)水(shuǐ)解(jiě)探針(zhēn)。

定(dìng)量的標(biāo)準樣(yàng)品：

（1）含有(yǒu)和待測(cè)樣品(pǐn)相(xiāng)同(tóng)擴(kuò)增(zēng)片段的克隆(lóng)質粒

（2）含(hán)有和(hé)待測樣品相同(tóng)擴(kuò)增片段的cDNA

（3）PCR的(dí)產物(wù)，可分別(bié)做(zuò)係(xì)列稀釋。