
簡(jiǎn)要(yào)描述:熒光(guāng)定量(liáng)PCR檢(jiǎn)測(cè)廠(chǎng)家由於該技(jì)術(shù)不僅(jǐn)實現了PCR從(cóng)定性到定量的飛躍,而(ér)且與常(cháng)規PCR相比,它具(jù)有(yǒu)特(tè)異性更強,有效解決PCR汙(wū)染問題,自動化程(chéng)度高等(děng)特(tè)點(diǎn),目前已(yǐ)得到廣(guǎng)泛應用(yòng);實時熒光定(dìng)量
產品型(xíng)號:
廠(chǎng)商(shāng)性(xìng)質:生產(chǎn)廠家(jiā)
更(gēng)新(xīn)時(shí)間(jiān):2024-05-13
訪(fǎng) 問 量:2817熒(yíng)光(guāng)定(dìng)量(liáng)PCR檢測廠(chǎng)家與(yǔ)普通(tōng)PCR的(dí)區別(bié):理(lǐ)論上(shàng)PCR是一(yī)個指數增長的(dí)過(guò)程,但是(shì)實(shí)際的PCR擴(kuò)增曲綫(xiàn)並不是標準的(dí)指(zhǐ)數(shù)曲綫(xiàn),而是(shì)S形曲(qū)綫(xiàn)。
熒光(guāng)定(dìng)量PCR檢(jiǎn)測廠家(jiā)這(zhè)是(shì)因為隨(suí)著PCR循(xún)環的增(zēng)多(duō),擴(kuò)增(zēng)規模迅速增大(dà),Taq酶,dNTP,引(yǐn)物(wù),甚至DNA模板等各種PCR要(yào)素逐漸不敷(fū)需(xū)求(qiú),PCR的效(xiào)率越來越低(dī),產物(wù)增長的速度就逐(zhú)漸減(jiǎn)緩(huǎn)。當(dāng)所有的Taq酶(méi)都被飽和(hé)以後(hòu),PCR就進入了(liǎo)平台期。由於各種環境因素的復雜(zá)相(xiāng)互(hù)作用,不同(tóng)的PCR反應(yīng)體(tǐ)係(xì)進入平台(tái)期的時機和平台(tái)期的(dí)高(gāo)低(dī)都有很(hěn)大變(biàn)化(huà),難(nán)以(yǐ)精確(què)控(kòng)製。所以(yǐ),即(jí)使是96次PCR重(zhòng)復實驗(yàn),各(gè)種條件(jiàn)基本*,所得結果有很大差異,所以在(zài)實驗(yàn)過程(chéng)中我(wǒ)們不(bù)能根據zui終PCR產物(wù)的(dí)量直(zhí)接(jiē)計算出(chū)起始(shǐ)DNA拷貝數。
技(jì)術於1996年(nián)由美(měi)國Applied Biosystems公司推出(chū),由於該技術(shù)不(bù)僅實(shí)現了(liǎo)PCR從(cóng)定性到(dào)定量的(dí)飛躍,而且與(yǔ)常(cháng)規PCR相(xiāng)比(bǐ),它具有特(tè)異性更強(qiáng),有效解決(jué)PCR汙(wū)染(rǎn)問題(tí),自動化(huà)程度高(gāo)等(děng)特(tè)點(diǎn),目前(qián)已得到廣泛(fàn)應用;實時熒光定(dìng)量
的方(fāng)法:熒(yíng)光定量PCR所使用的熒(yíng)光化學可(kě)分(fēn)為(wéi)兩(liǎng)種:熒(yíng)光探針(zhēn)和熒光染(rǎn)料(liào)。而熒(yíng)光定量 PCR 的方(fāng)法相應的可(kě)分為特異(yì)類和(hé)非特異類兩類,特(tè)異(yì)性(xìng)檢測(cè)方法(fǎ)是在(zài)PCR反應中利(lì)用(yòng)標記熒光(guāng)染料的基因特(tè)異寡(guǎ)核(hé)苷酸探(tàn)針來檢(jiǎn)測產(chǎn)物;而非特(tè)異(yì)性檢測(cè)方法(fǎ)是在(zài)在(zài)PCR反應體係(xì)中(zhōng),加入過(guò)量(liáng)熒光(guāng)染(rǎn)料,熒(yíng)光(guāng)染料特(tè)異(yì)性地摻入DNA雙(shuāng)鏈(liàn)後,發射(shè)出熒光(guāng)信號。前(qián)者由於(yú)增(zēng)加(jiā)了探針的識別(bié)步驟,特(tè)異(yì)性更高,但(dàn)後者則簡便易行。