DNA抽提和純化(huà)主要是CTAB方(fāng)法，其他的方法(fǎ)還(huán)有(yǒu)物理方(fāng)式如玻璃珠法，超(chāo)聲(shēng)波法，研磨法，凍融(róng)法。化學方式(shì)如異硫氰(qíng)酸(suān)胍法，鹼裂(liè)解(jiě)法(fǎ)。生物方式：酶法。根據(jù)核酸分離純化方式的(dí)不同有(yǒu)；矽質(zhì)材(cái)料，陰離子交換樹脂(zhī)等。
DNA抽提(tí)和純化總的原則：
1，保證核(hé)酸(suān)一級結構的(dí)完(wán)整性；
2，核(hé)酸樣品中不應(yīng)存在對(duì)酶(méi)有抑製作(zuò)用的(dí)有(yǒu)機溶(róng)劑(jì)和過高濃(nóng)度的金(jīn)屬離子(zǐ)；
3，其他生物(wù)大(dà)分(fēn)子(zǐ)如蛋(dàn)白(bái)質(zhì)，多(duō)糖和脂(zhī)類(lèi)分(fēn)子(zǐ)的(dí)汙(wū)染應降(jiàng)低到(dào)zui低程(chéng)度。
方法介(jiè)紹(shào)：
一，酚抽(chōu)提法(fǎ)：先用蛋酶K，SDS破碎(suì)細胞(bāo)，消化(huà)蛋白(bái)，然後用酚和(hé)酚(fēn)-氯DNA大小為(wéi)100-150kb
二(èr)，甲酰(xiān)胺(àn)解聚(jù)法：破(pò)碎細胞同上，然後用高濃度甲酰胺解(jiě)聚(jù)蛋白質與(yǔ)DNA的結(jié)合(hé)，再(zài)透析(xī)獲得DNA可得DNA200kb左右。
三，玻(bō)璃棒纏繞法(fǎ)：用(yòng)鹽(yán)酸(suān)胍裂(liè)解細(xì)胞(bāo)，將(jiāng)裂(liè)解物鋪(pū)於(yú)乙醇(chún)上，然(rán)後用帶(dài)鉤或(huò)U型玻璃棒在(zài)界麵輕(qīng)攪，DAN沉(chén)澱液繞(rào)於(yú)玻棒。生成DNA約80kb。
四，異(yì)丙醇沉澱法：基(jī)本同1法，僅用(yòng)二倍容(róng)積異丙(bǐng)醇替代乙醇，可去除小分(fēn)子RNA（在異丙醇(chún)中可(kě)溶狀態）
五，表麵(miàn)活(huó)性劑快速製備(bèi)法(fǎ)：用(yòng)Triton X-100A或NP40表麵活(huó)性劑破(pò)碎(suì)細胞，然後(hòu)用蛋(dàn)白(bái)酶(méi)K或(huò)酚去除蛋白(bái)，乙醇(chún)沉(chén)澱或(huò)透析。
六，加(jiā)熱法(fǎ)快速製備：加熱(rè)96℃-100℃，五分鐘，然後(hòu)離(lí)心(xīn)後取上(shàng)清(qīng)，可用於PCR反應(yīng)。
七，鹼(jiǎn)變性快(kuài)速(sù)製備(bèi)：先(xiān)用NaOH作用(yòng)20分鐘，再加HCI中和，離(lí)心(xīn)後(hòu)取(qǔ)上清，含(hán)少(shǎo)量(liáng)DNA。
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