在細(xì)胞克隆中,對培(péi)養(yǎng)的細(xì)胞來(lái)說(shuō),從(cóng)原有的(dí)克隆中,再(zài)篩(shāi)選出具有某(mǒu)種特(tè)性(xìng)的細胞(bāo)進(jìn)行培(péi)養,就是亞(yà)克(kè)隆(lóng)。
在分(fēn)子克(kè)隆(lóng)中,從大片(piàn)段(duàn)的克(kè)隆中(zhōng)選取(qǔ)特(tè)定小片段再克隆(lóng)。
亞(yà)克隆就(jiù)是初步克隆(lóng)的(dí)外(wài)源(yuán)片段往往較長,含(hán)有(yǒu)許多(duō)目的(dí)基因(yīn)片段以(yǐ)外(wài)的(dí)DNA片段(duàn),將目(mù)的基因(yīn)所(suǒ)對(duì)應的(dí)一(yī)小段DNA找出(chū)來。
對已經獲(huò)得的(dí)目的DNA片段進行(háng)重新克隆,其目的在(zài)於(yú)對(duì)目的(dí)DNA進(jìn)行進一步(bù)分(fēn)析,或者進行(háng)重(zhòng)組改(gǎi)造等。
基本(běn)過程包(bāo)括(kuò):
(1)目的(dí)DNA片(piàn)段和(hé)載體的(dí)製(zhì)備;
(2)目(mù)的(dí)DNA片(piàn)段(duàn)和載體(tǐ)的連(lián)接;
(3)連接(jiē)產(chǎn)物(wù)的轉化;
(4)重組子(zǐ)篩選(xuǎn)。
技(jì)術(shù):限製性內切(qiē)酶(méi)是(shì)一(yī)類能識別雙鏈DNA分子中特(tè)異核(hé)苷(gān)酸序列(liè)的(dí)DNA水解酶(méi),該類酶是體外剪(jiǎn)切(qiē)基因片(piàn)段的重要工(gōng)具(jù)。