CRISPR-Cas9基(jī)因敲除小鼠(shǔ)，通過體外轉錄，獲得(dé)編碼Cas9酶與SgRNA，然後通過(guò)受(shòu)精卵顯微注(zhù)射(shè)，獲得(dé)基(jī)因敲除(chú)小鼠模(mó)型, 為快速製(zhì)備基因敲除小(xiǎo)鼠(shǔ)開辟(bì)了(liǎo)新的(dí)技(jì)術(shù)途(tú)徑。

基屹(yì)生(shēng)物(wù)可(kě)以(yǐ)根據(jù)客(kè)戶的需求(qiú)設(shè)計(jì)高效特(tè)異的3-5條Guide RNA，並(bìng)通(tōng)過細(xì)胞實驗(yàn)篩選(xuǎn)的(dí)序列(liè)，保證成(chéng)功率(shuài)。整(zhěng)個實驗流(liú)程(chéng)僅需(xū)3-5個(gè)月。

CRISPR-Cas9基因敲除小鼠(shǔ)，通過(guò)體(tǐ)外轉錄(lù)，獲(huò)得編碼(mǎ)Cas9酶(méi)與(yǔ)SgRNA，然(rán)後(hòu)通(tōng)過(guò)受(shòu)精(jīng)卵顯(xiǎn)微注(zhù)射，獲得基(jī)因(yīn)敲除小鼠(shǔ)模(mó)型(xíng), 為快速(sù)製備基因(yīn)敲除小鼠(shǔ)開辟了新的技術途(tú)徑。

在沒(méi)有(yǒu)外加供(gōng)體(tǐ)模(mó)板DNA的(dí)情況(kuàng)下，細胞在CRISPR-Cas9剪切目的(dí)基(jī)因後，通(tōng)過NHEJ途(tú)徑(jìng)產生移(yí)碼突(tū)變(biàn)，從(cóng)而獲得基(jī)因敲除(chú)小(xiǎo)鼠(shǔ)；在(zài)外加(jiā)供(gōng)體(tǐ)模板DNA後，細胞(bāo)在CRISPR-Cas9剪切目(mù)的基(jī)因(yīn)後，通過HDR途徑(jìng)將外源DNA序列引入(rù)到基(jī)因組中，從而獲得(dé)基(jī)因敲入(rù)小鼠或條件(jiàn)型基因敲(qiāo)除(chú)小鼠。