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相(xiāng)關文(wén)章

腺病(bìng)毒(dú)包(bāo)裝

簡要描述(shù):腺病(bìng)毒(dú)(Adenovirus)是(shì)目前*可(kě)靠的重組(zǔ)病(bìng)毒表達(dá)係統之一,可(kě)用(yòng)於在(zài)哺乳細(xì)胞中(zhōng)瞬時(shí)及高水平地(dì)表(biǎo)達shRNA或(huò)目的蛋白(bái)。

  • 產(chǎn)品型(xíng)號:
  • 廠商(shāng)性質:生產廠(chǎng)家
  • 更新時間:2024-05-13
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       腺(xiàn)病(bìng)毒(Adenovirus)是(shì)目前可靠(kào)的(dí)重組病毒表(biǎo)達係統之(zhī)一(yī),可(kě)用於(yú)在(zài)哺(bǔ)乳(rǔ)細胞中瞬(shùn)時及(jí)高水(shuǐ)平(píng)地表達(dá)shRNA或目的(dí)蛋白。其(qí)具備以下優(yōu)點:
  1. 宿(sù)主範圍廣(guǎng)。腺病毒(dú)可(kě)感染(rǎn)一係列哺(bǔ)乳動(dòng)物細胞(bāo),除可(kě)感(gǎn)染幾(jī)乎所有(yǒu)人的細(xì)胞(bāo)類型外(wài),還可感染包(bāo)括大(dà)鼠,小鼠,兔,豬,羊,猴,雞(jī)等(děng)物(wù)種。
  2. 因腺病毒的感染(rǎn)不依賴(lài)細(xì)胞周期,故其(qí)既可以感(gǎn)染增殖細(xì)胞(bāo)也(yě)可以(yǐ)感染非增(zēng)殖細(xì)胞(bāo)。
  3. 腺病毒(dú)具有嗜(shì)上(shàng)皮(pí)細胞特性,因(yīn)大(dà)多數腫瘤細胞(bāo)均(jūn)屬(shǔ)於上皮細胞,這使得腺病(bìng)毒(dú)非常適合(hé)應用(yòng)於(yú)基(jī)因(yīn)治療領域(yù)。
  4. 病毒滴(dī)度高,可用(yòng)於動物水平的(dí)實驗(yàn)。
  5. 有較好的生(shēng)物安(ān)全性(xìng)。腺病毒(dú)攜(xié)帶的基因(yīn)不會整合到宿(sù)主細(xì)胞基因組中;實驗中雖然(rán)會(huì)有(yǒu)一定機(jī)率(shuài)出(chū)現(xiàn)RCA(即復製型(xíng)腺病毒),但(dàn)由(yóu)於大多數(shù)成人(rén)體內(nèi)都有針對腺(xiàn)病毒(dú)的抗(kàng)體,所(suǒ)以一(yī)般危害不(bù)大(dà)。
技(jì)術(shù)要點
重組(zǔ)腺病毒(dú)的包(bāo)裝製(zhì)備:重組(zǔ)腺(xiàn)病毒是(shì)從由(yóu)侵染色斑(bān)組成單(dān)位(wèi)(pfu)中分(fēn)離獲(huò)得的。一個單色斑是綫性載體質(zhì)粒(lì)轉(zhuǎn)染後(hòu)在(zài)20×15 cm板(bǎn)上由293A細(xì)胞(bāo)連(lián)續侵(qīn)染後(hòu)被(bèi)挑選(xuǎn)和擴增形成的。重(zhòng)組腺(xiàn)病(bìng)毒(dú)可通(tōng)過超(chāo)速離(lí)心純(chún)化,並測定(dìng)滴(dī)度及(jí)進行(háng)PCR鑒定。純化後重(zhòng)組(zǔ)腺病毒的滴定濃度(dù)為1010pfu/ml,獲(huò)得的量為2-4 ml。
重組(zǔ)腺病(bìng)毒的特(tè)性:一般(bān)的,單(dān)個腺(xiàn)病(bìng)毒通(tōng)常是(shì)在30×150mm細胞培養(yǎng)皿(mǐn)中製(zhì)備(bèi)的(dí)。
獲(huò)得量(liáng):1×10病毒顆粒/細胞
滴定(dìng)濃度:1×1010~1×1012個病毒基(jī)因組(zǔ)/ml
zui終(zhōng)體(tǐ)積:1 ml純化後(hòu)的病(bìng)毒液(yè)(儲(chǔ)存(cún)於(yú)PBS)
儲(chǔ)存:批量儲(chǔ)存(cún)的*條(tiáo)件為-80°C
幾(jī)種(zhǒng)病毒(dú)載(zǎi)體的區(qū)別:

腺(xiàn)病(bìng)毒(dú)表(biǎo)達係(xì)統
慢病毒表達係統(tǒng)
逆轉錄病毒(dú)
病(bìng)毒基(jī)因組(zǔ)成(chéng)
雙鏈DNA
單鏈(liàn)RNA
單鏈RNA
載導容量
< 8 kb
< 8 kb
< 6kb
基因整(zhěng)合功能
無。病(bìng)毒(dú)基(jī)因組(zǔ)遊離(lí)於(yú)宿(sù)主基因組(zǔ)外(wài),瞬(shùn)時(shí)表(biǎo)達(dá)外(wài)源(yuán)基因
有(yǒu)。病(bìng)毒(dú)基(jī)因(yīn)組整(zhěng)合於(yú)宿主(zhǔ)基(jī)因組,長時間,穩(wěn)定(dìng)表達外源基因(yīn)
有(yǒu)。
表(biǎo)達豐度
高(gāo)水(shuǐ)平表達
中(zhōng)
中(zhōng)
表達時間(jiān)
快(kuài)(1-2天(tiān))
慢(2-4天)
快(kuài)(1-2天(tiān))
感(gǎn)染(rǎn)細(xì)胞類(lèi)型(xíng)
分(fēn)裂和不分裂(liè)細胞
分(fēn)裂(liè)和不分裂(liè)細胞。適用於難轉染細(xì)胞(bāo)
感(gǎn)染分裂細胞,但(dàn)在(zài)幹細胞中表達效(xiào)率低
滴度TU/ml
10^12
10^9
10^9
四環素(sù)誘(yòu)導係統(tǒng)
不可(kě)以(yǐ)
TET-ON , TET-OFF
不(bù)可以
毒性作用(yòng)
細(xì)胞(bāo)毒性
遺傳(chuán)毒性
遺(yí)傳毒性
免(miǎn)疫(yì)原性(xìng)
高免(miǎn)疫原(yuán)性(xìng)
低(dī)免(miǎn)疫原性
低(dī)免疫(yì)原(yuán)性
動物(wù)模型
不能(néng)得到(dào)轉基因(yīn)動物
可產(chǎn)生轉基因(yīn)動物,效(xiào)率達(dá)50以(yǐ)上
可(kě)以,但(dàn)很難
安全(quán)係數
高(gāo)
能(néng)否(fǒu)用(yòng)於MIRCORNA
可(kě)以
可以
不(bù)可以(yǐ)
RNAi
病(bìng)毒進(jìn)入細(xì)胞往往引起(qǐ)細(xì)胞內(nèi)幹擾素(sù)反(fǎn)應,不(bù)適合做RNAi實驗(yàn)
適(shì)合,是(shì)RNAi實驗的優(yōu)選(xuǎn)工(gōng)具
可(kě)以用(yòng)作RNAi實(shí)驗(yàn)
基(jī)因(yīn)過(guò)表達
包(bāo)裝(zhuāng)容量(liáng)較大(dà)。可以(yǐ)滿(mǎn)足較大(dà)基(jī)因的包裝,是過表(biǎo)達基(jī)因的(dí)優(yōu)選工具(jù)
包(bāo)裝容量(liáng)有(yǒu)限,過表達(dá)的基因(yīn)過(guò)大時(shí),病(bìng)毒滴度(dù)受到影響(xiǎng)
包(bāo)裝(zhuāng)容(róng)量有限,過(guò)表達的(dí)基因(yīn)過(guò)大(dà)時,病毒滴度(dù)受到(dào)影響
常見(jiàn)應(yīng)用
1,體外細胞(bāo)基(jī)因(yīn)轉導(dǎo)2,基因治療
1,體外(wài)細胞(bāo)基因(yīn)轉導2,基因治(zhì)療
體外(wài)細胞(bāo)基(jī)因轉導,突變篩選(xuǎn),功能(néng)基(jī)因庫(kù)構(gòu)建(jiàn) 

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