慢(màn)病毒包(bāo)裝服(fú)務

 慢(màn)病毒簡(jiǎn)介(jiè)

    慢病(bìng)毒(dú)是(shì)逆(nì)轉(zhuǎn)錄病毒(dú)的(dí)一種
，具有逆轉(zhuǎn)錄病毒的基(jī)本結構和(hé)特性
：整(zhěng)合(hé)入宿主(zhǔ)細(xì)胞(bāo)基(jī)因組(zǔ)
，長(cháng)期(qī)表(biǎo)達
，可用(yòng)於(yú)轉(zhuǎn)基(jī)因動(dòng)物製(zhì)備；但也有(yǒu)不(bù)同於逆轉錄(lù)病(bìng)毒的(dí)組(zǔ)份和(hé)特性(xìng)
：比逆(nì)轉錄病毒(dú)具有更(gēng)高的(dí)滴度(dù)
，不僅(jǐn)可(kě)以感(gǎn)染(rǎn)分裂(liè)期(qī)細胞
，更重要的(dí)
，還能(néng)感染非分(fēn)裂(liè)期的細(xì)胞。利用慢病(bìng)毒載體(tǐ)
，可(kě)以研(yán)究啟動(dòng)子(zǐ)的調控(kòng)，過表達(dá)特(tè)定基(jī)因(yīn)或沉默特(tè)定(dìng)基因(yīn)。

慢病毒包裝(zhuāng)技術特(tè)點(diǎn)

慢(màn)病(bìng)毒(dú)包裝服務流(liú)程

A. 慢病(bìng)毒(dú)載體(tǐ)的構建(jiàn)
：

根據不同(tóng)的研(yán)究需求構(gòu)建(jiàn)慢病毒載體(tǐ)
，如用於RNAi的慢病(bìng)毒(dú)載(zǎi)體(tǐ)，用於基因(yīn)過(guò)表(biǎo)達的慢病(bìng)毒載(zǎi)體(tǐ)，用(yòng)於啟動子活性(xìng)研究的(dí)慢病毒(dú)載(zǎi)體等(děng)；

B. 慢(màn)病毒(dú)包裝過(guò)程
：

    將重組病(bìng)毒質粒及其(qí)輔助(zhù)包裝(zhuāng)質粒共轉染至包裝細胞(bāo)中(zhōng)
，收集富含慢(màn)病(bìng)毒(dú)顆粒(lì)的(dí)細胞上清液(yè)
，對(duì)其濃縮(suō)後(hòu)得到高(gāo)滴度(dù)的(dí)慢病毒濃縮(suō)液
，在293T細(xì)胞(bāo)中測(cè)定並標定病(bìng)毒(dú)滴(dī)度。

C. 慢病毒包(bāo)裝結果
：

滴定(dìng)濃(nóng)度
：1×107～1×108TU/ml

zui終體(tǐ)積(jī)
：1 ml純化(huà)後的病毒液（儲存於(yú)PBS）

儲(chǔ)存
：批量(liáng)儲存的*條件(jiàn)為(wéi)-80°C。

慢病毒(dú)包(bāo)裝用途
：

慢(màn)病毒載體包(bāo)裝之後成為(wéi)假病(bìng)毒(dú)顆(kē)粒(lì)後(hòu)
，可用於:

• 感染原代(dài)細(xì)胞；
• 製備穩定表達/沉默(mò)特(tè)定基因(yīn)的單克(kè)隆(lóng)細(xì)胞株；
• in vivo的(dí)基因操作(zuò)；
• 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物
  ，特別是轉(zhuǎn)基(jī)因大鼠(shǔ)的製備(bèi)。