CCK-8試劑(jì)盒(hé)的檢測(cè)步(bù)驟(zhòu)及使(shǐ)用(yòng)注(zhù)意事(shì)項(xiàng)介紹

　　CCK-8試(shì)劑盒(hé)的(dí)檢測(cè)步驟(zhòu)及使用注(zhù)意事項介(jiè)紹 
　　CCK-8試劑盒利用(yòng)了同仁化學(xué)研(yán)究所(suǒ)(Dojindo)開發的四唑鹽——WST-8(2-(2-甲(jiǎ)氧基-4-硝(xiāo)苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單(dān)鈉(nà)鹽)，它(tā)在電子載體1-MethoxyPMS存(cún)在(zài)的情(qíng)況(kuàng)下能(néng)夠被(bèi)還原成水溶(róng)性的(dí)甲臢(zā)染料。
　　CCK-8試(shì)劑盒的檢測(cè)步驟(zhòu)：
　　1，向各孔(kǒng)中加(jiā)入100μl細(xì)胞(bāo)懸(xuán)液。
　　2，在(zài)37℃下預(yù)孵(fū)育培(péi)養(yǎng)板。
　　3，向各孔中(zhōng)加(jiā)入(rù)各濃度(dù)的待測溶(róng)液10μl。
　　4，37℃下孵育。
　　5，向(xiàng)各(gè)孔中(zhōng)加入(rù)10μl的CCK-8溶液(yè)。
　　6，37℃下孵育1-4小時(shí)。
　　7，測定450nm處的OD值。
　　CCK-8試(shì)劑(jì)盒的(dí)使用注意(yì)事項：
　　(1)使用(yòng)適(shì)當的培(péi)養(yǎng)基製(zhì)備50,000-100,000個/ml的細胞懸(xuán)液。
　　(2)建議使(shǐ)用(yòng)CO2培(péi)養箱(xiāng)過(guò)夜(yè)預(yù)培養(yǎng)。
　　(3)使(shǐ)用培(péi)養基(jī)或PBS來(lái)製(zhì)備(bèi)溶液。
　　(4)如果(guǒ)待測溶(róng)液(yè)有(yǒu)還(huán)原性(xìng)，測定(dìng)不(bù)含細胞(bāo)，但含(hán)有(yǒu)CCK-8的待(dài)測(cè)溶液(yè)在450nm處(chǔ)的空白吸(xī)光度(dù)。如果(guǒ)該吸光度很小，則可(kě)以直(zhí)接加(jiā)入(rù)CCK-8，如果吸光度相對較(jiào)大，則(zé)需要(yào)除(chú)去培養基，並用(yòng)培(péi)養基洗(xǐ)滌(dí)細(xì)胞兩(liǎng)次，然(rán)後加(jiā)入新的100μl培養基和10μlCCK-8進(jìn)行檢測(cè)。
　　(5)白(bái)細胞可能需要培(péi)養較長時間(jiān)。