培養(yǎng)基(jī)既是提供(gōng)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和(hé)促使(shǐ)細胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)

　　培養(yǎng)基，是指(zhǐ)供給(gěi)微(wēi)生(shēng)物，植物或動(dòng)物(wù)（或組(zǔ)織(zhī)）生長繁(fán)殖的，由不同營養物質(zhì)組(zǔ)合(hé)配製(zhì)而成(chéng)的營(yíng)養基質(zhì)。一般都(dū)含(hán)有(yǒu)碳水(shuǐ)化合(hé)物(wù)，含氮(dàn)物質，無(wú)機(jī)鹽（包(bāo)括(kuò)微(wēi)量元素），維(wéi)生(shēng)素和(hé)水等幾大類(lèi)物質。培(péi)養(yǎng)基既是(shì)提供細胞營(yíng)養和促使細胞增(zēng)殖的(dí)基(jī)礎(chǔ)物(wù)質(zhì)，也是細胞生(shēng)長和繁(fán)殖的生存(cún)環境。
　　1，培養(yǎng)基(jī)的(dí)過濾澄(chéng)清(qīng)
　　液體(tǐ)培(péi)養(yǎng)基必須(xū)澄清,瓊(qióng)脂(zhī)培養(yǎng)基(jī)也(yě)應透明(míng)無顯(xiǎn)著沉澱,因此(cǐ),須(xū)要采用(yòng)過濾(lǜ)或其(qí)它(tā)澄清方(fāng)法(fǎ)以(yǐ)達到此項要(yào)求.一般液體(tǐ)培養(yǎng)基可(kě)用濾紙過濾(lǜ)法(fǎ),濾紙(zhǐ)應折疊成折(zhē)扇或(huò)漏鬥(dǒu)形,以(yǐ)避免因液(yè)壓不均(jūn)匀而(ér)引(yǐn)起濾紙破(pò)裂.
　　瓊(qióng)脂培(péi)養基可用清潔(jié)的(dí)白色薄(báo)絨布(bù)趁熱(rè)過濾(lǜ).亦可用中(zhōng)間夾有薄層(céng)吸(xī)水(shuǐ)棉的雙層(céng)紗(shā)布(bù)過濾(lǜ).新(xīn)製(zhì)肉，肝(gān)，血和土豆等(děng)浸(jìn)液(yè)時(shí)，則(zé)須先用絨布將碎渣(zhā)濾去,再用(yòng)濾(lǜ)紙反復(fù)過(guò)濾.如(rú)過(guò)濾(lǜ)法不能達到澄清要(yào)求，則須(xū)用(yòng)蛋清澄清法.即(jí)將冷卻至55至(zhì)60℃的培(péi)養基放(fàng)入大的(dí)三角燒瓶內(nèi),裝入(rù)量不得超過燒瓶容(róng)量的(dí)1/2,每1000毫升(shēng)培養基(jī)加入1至(zhì)2個雞蛋(dàn)的蛋白,強力振(zhèn)搖3至5分鐘,置高(gāo)壓(yā)蒸汽滅菌(jūn)器中(zhōng)，121℃加熱20分鐘(zhōng)，取(qǔ)出趁熱(rè)以(yǐ)絨布(bù)過濾(lǜ)即可(kě).
　　2，培(péi)養(yǎng)基(jī)的(dí)分(fēn)裝
　　培(péi)養基的(dí)分裝,應按使(shǐ)用(yòng)的目(mù)的(dí)和(hé)要(yào)求(qiú),分裝於試管(guǎn)，燒瓶等適(shì)當(dāng)容器內.分裝(zhuāng)量不得(dé)超(chāo)過容(róng)器(qì)裝盛量的(dí)2/3.容(róng)器(qì)口(kǒu)可(kě)用(yòng)墊(diàn)有防(fáng)濕紙(zhǐ)的(dí)棉塞封堵(dǔ),其(qí)外還須用防水紙包紮(現試(shì)管一(yī)般(bān)多有(yǒu)用(yòng)螺旋蓋者(zhě)).分(fēn)裝時(shí)好(hǎo)能使用(yòng)半(bàn)自動或電動的定量(liáng)分裝器(qì).分裝瓊脂斜麵培養(yǎng)基(jī)時(shí),分裝(zhuāng)量(liáng)應以(yǐ)能(néng)形(xíng)成(chéng)2/3底層(céng)和(hé)1/3斜(xié)麵(miàn)的量(liáng)為(wéi)洽當.分(fēn)裝容(róng)器應預先(xiān)清(qīng)洗幹淨並經(jīng)幹烤消(xiāo)毒,以利於(yú)培養基的*滅菌.每批培養(yǎng)基應另(lìng)外分(fēn)裝20毫升培養(yǎng)基於一(yī)小玻(bō)璃(lí)瓶(píng)中(zhōng),隨該批(pī)培養(yǎng)基同(tóng)時滅(miè)菌,以為測(cè)定該(gāi)批(pī)培(péi)養(yǎng)基終pH之用(yòng).
　　3，培養(yǎng)基的(dí)滅菌
　　一般(bān)培(péi)養(yǎng)基可采用(yòng)121℃高壓蒸汽滅菌15分(fēn)鐘的(dí)方(fāng)法.在各種培養基製(zhì)備(bèi)方(fāng)法中(zhōng),如無(wú)特(tè)殊規定(dìng),即可(kě)用(yòng)此法(fǎ)滅(miè)菌.
　　某些畏熱(rè)成分,如糖(táng)類(lèi),應(yīng)另行配(pèi)成(chéng)20%或更高(gāo)的濃(nóng)液(yè),以過(guò)濾或間歇滅(miè)菌(jūn)法(fǎ)消毒(dú),以後再用無(wú)菌操作(zuò)技術(shù)，定(dìng)量加於培(péi)養基.明膠(jiāo)培(péi)養基亦應用較低(dī)溫度滅(miè)菌(jūn).血液，體液和(hé)抗生素(sù)等(děng)則應以(yǐ)無菌操作(zuò)技術抽取(qǔ)和(hé)加(jiā)入於經(jīng)冷卻約50℃左右的(dí)培養(yǎng)基中.
　　瓊脂斜(xié)麵培(péi)養基應在(zài)滅(miè)菌後立(lì)即取出,冷至(zhì)55℃-60℃時(shí),擺(bǎi)置成(chéng)適當斜麵(miàn),待(dài)其自然(rán)凝固.
　　4，培(péi)養(yǎng)基(jī)的質量(liáng)測試
　　每批培養(yǎng)基製(zhì)備好(hǎo)以後(hòu),應(yīng)仔(zī)細(xì)檢(jiǎn)查一(yī)遍(biàn),如發現(xiàn)破裂，水(shuǐ)分浸入(rù)，色(sè)澤異常，棉塞被培(péi)養(yǎng)基沾染等(děng)，均應(yīng)挑(tiāo)出棄去.並(bìng)測定其終pH.
　　將(jiāng)全(quán)部培養基(jī)放(fàng)入36±1℃恒(héng)溫(wēn)箱培養過(guò)夜(yè),如(rú)發現有(yǒu)菌(jūn)生(shēng)長(cháng),即棄(qì)去.
　　用有(yǒu)關的(dí)標(biāo)準菌株(zhū)接種(zhǒng)1至(zhì)2管或瓶(píng)培養(yǎng)基,培養24至(zhì)48小時,如無菌生長或(huò)生長不(bù)好(hǎo).應(yīng)追(zhuī)查(chá)原因(yīn)並(bìng)重復(fù)接(jiē)種一次,如結(jié)果仍(réng)同(tóng)前,則(zé)該批(pī)培(péi)養(yǎng)基即應(yīng)棄去,不能(néng)使(shǐ)用.
　　5，培養(yǎng)基(jī)的(dí)保(bǎo)存
　　培養(yǎng)基應(yīng)存放(fàng)於冷暗(àn)處,好(hǎo)能(néng)放於(yú)普(pǔ)通(tōng)冰箱內.放置(zhì)時間(jiān)不宜超過(guò)一周(zhōu),傾注(zhù)的平板培(péi)養基(jī)不(bù)宜超(chāo)過3天(tiān).每批培養(yǎng)基均必須附(fù)有該(gāi)批培(péi)養基製備(bèi)記錄(lù)副(fù)頁或(huò)明(míng)顯標簽(qiān).