多糖多(duō)酚植物總(zǒng)RNA快速提(tí)取(qǔ)試(shì)劑(jì)盒（離心柱型(xíng)）  
 

下(xià)載(zǎi)說明(míng)書

 

試劑盒(hé)組成：   

產(chǎn)品說明：

      改進的異硫氰酸(suān)胍(guā)/酚一步(bù)法裂解細胞(bāo)和滅活(huó)RNA 酶(méi)， 然(rán)後總RNA在高(gāo)離序鹽(yán)狀(zhuàng)態(tài)下(xià)選擇性吸(xī)附(fù)於離(lí)心(xīn)柱內(nèi)矽基質(zhì)膜(mó)， 再(zài)通(tōng)過一係列(liè)快速(sù)的(dí)漂(piāo)洗－離心的(dí)步(bù)驟(zhòu), 去蛋白液和漂洗液(yè)將細胞代謝物，蛋(dàn)白(bái)等雜質(zhì)去除(chú)， zui後低鹽(yán)的RNase free water將(jiāng)純淨RNA從矽基質膜上洗(xǐ)脫(tuō)。

植物組(zǔ)織RNA提取的(dí)難點

1，酚(fēn)類化(huà)合物(wù)的(dí)幹(gān)擾

許(xǔ)多植(zhí)物組織(zhī)特別是植物的(dí)果實和樹木(mù)類(lèi)植(zhí)物中富(fù)含(hán)酚類化合(hé)物。酚類物質的含(hán)量(liáng)會(huì)隨著(zhuó)植物的生(shēng)長(cháng)而(ér)增加。因(yīn)而從(cóng)幼嫩的植(zhí)物材料(liào)中更容易提取RNA。此外，針(zhēn)葉類(lèi)植物的針(zhēn)葉(yè)中多(duō)酚的(dí)含量比(bǐ)在(zài)落葉(yè)植(zhí)物的(dí)葉子(zǐ)中要(yào)高(gāo)得多。在(zài)植物材(cái)料匀漿(jiāng)時，酚類(lèi)物(wù)質(zhì)會(huì)釋放出(chū)來(lái)，氧化(huà)後使匀(yún)漿(jiāng)液(yè)變(biàn)為褐(hè)色，並隨氧(yǎng)化程(chéng)度的增(zēng)加而加深，這(zhè)一現象被(bèi)稱(chēng)為褐(hè)化(huà)效應(brownins effect)。被氧化的(dí)酚類(lèi)化(huà)合(hé)物(如(rú)醌(kūn)類)能與(yǔ)RNA穩定(dìng)地結(jié)合，從而影(yǐng)影(yǐng)響RNA的(dí)分(fēn)離(lí)純(chún)化。

2，多糖(táng)的幹(gān)擾(rǎo)

多糖(táng)的(dí)汙染是(shì)提取植物RNA時常遇到的另一個棘手(shǒu)的問題(tí)．，植(zhí)物組織中(zhōng)往往(wǎng)富含多糖，而多(duō)糖的許多理(lǐ)化性(xìng)質(zhì)與RNA很(hěn)相似，因(yīn)此很(hěn)難將它(tā)們分(fēn)開。在去(qù)除多糖(táng)的同時(shí)RNA也(yě)被裹(guǒ)攜走(zǒu)了，造成(chéng)RNA產(chǎn)量(liáng)的(dí)減(jiǎn)少：而在(zài)沉澱RNA

時(shí)，也(yě)產(chǎn)生多(duō)糖(táng)的(dí)凝(níng)膠狀沉澱，這(zhè)種含有(yǒu)多糖的(dí)RNA沉(chén)澱(diàn)難溶(róng)於(yú)水，或溶(róng)解(jiě)後產(chǎn)生(shēng)粘(nián)稠狀(zhuàng)的溶液(yè)。由於多糖可以(yǐ)抑製(zhì)許(xǔ)多酶的活(huó)性，因此(cǐ)汙染了多糖(táng)的(dí)RNA樣品(pǐn)無法(fǎ)用(yòng)於(yú)進(jìn)一步(bù)的分(fēn)子生(shēng)物(wù)學研(yán)究(jiū)。

3，蛋白雜質(zhì)的(dí)影響(xiǎng)

蛋白質是汙染RNA樣(yàng)品的(dí)又一個重要(yào)因(yīn)素。由(yóu)幹RNase和多酚氧化(huà)酶(méi)亦(yì)屬於蛋白質，因(yīn)而要獲(huò)得(dé)完整的(dí)，高質量的RNA就(jiù)必須有(yǒu)效(xiào)地(dì)去除蛋(dàn)白雜質(zhì)。

4，次級代(dài)謝產物(wù)的(dí)影(yǐng)響(xiǎng)

從植物組(zǔ)織(zhī)中提取高質量(liáng)RNA的另(lìng)一個難點是許多高(gāo)等植物(wù)組(zǔ)織(zhī)尤其(qí)是(shì)成(chéng)熟(shú)組織能產(chǎn)生某(mǒu)些(xiē)水溶性的次(cì)級代謝(xiè)產物(wù)，這(zhè)些次級代(dài)謝產物很(hěn)容(róng)易(yì)與(yǔ)RNA結合(hé)並與(yǔ)RNA共同(tóng)被抽提出來(lái)而阻(zǔ)礙(ài)具有生(shēng)物(wù)活(huó)性的RNA的分(fēn)離。

試劑(jì)盒特點:

◆    快(kuài)速(sù)去除多(duō)糖(táng)，上樣(yàng)孔無(wú)多糖(táng)汙(wū)染：

◆    *多酚沉澱劑，防(fáng)多酚氧(yǎng)化(huà)同(tóng)時(shí)沉(chén)澱(diàn)多酚：

◆    *漂洗液(yè)RD，特異(yì)性(xìng)洗掉(diào)基(jī)因組(zǔ)，確(què)保得到的RNA無(wú)基因組(zǔ)汙(wū)染：

◆    成功提取進口TRIzol及(jí)Q公司試劑盒無法很好(hǎo)提取的(dí)多種(zhǒng)植物RNA，包括仙(xiān)人掌，仙人球(qiú)，蘆(lú)薈(huì)，鳳(fèng)梨(lí)，水仙(xiān)，黃瓜，辣椒(jiāo)，胡(hú)蘿卜(bǔ)，玉米，大(dà)豆，百(bǎi)合，小(xiǎo)麥，西紅(hóng)柿，花菜(cài)，油菜籽等；

提取範(fàn)圍(wéi):

仙(xiān)人(rén)掌，仙(xiān)人(rén)球(qiú)，水仙，黃瓜(guā)，胡蘿(luó)卜，辣椒，西紅柿，煙(yān)草(cǎo)，玉(yù)米(mǐ)，大豆(dòu)，百合，小(xiǎo)麥(mài)，擬(nǐ)南(nán)芥和其他大多(duō)數(shù)植(zhí)物(wù)。

產量:

每100mg組織10～50μg不等