熒光(guāng)定(dìng)量(liáng)PCR的分(fēn)子生物(wù)學研究和(hé)醫(yī)學研究(jiū)中(zhōng)的應用(yòng)

 　　熒(yíng)光定量(liáng)PCR的(dí)分(fēn)子生物學(xué)研究(jiū)和(hé)醫學研(yán)究中(zhōng)的(dí)應(yīng)用
　　分(fēn)子(zǐ)生物(wù)學研究
　　1 核(hé)酸定(dìng)量(liáng)分析。 對傳(chuán)染性疾病(bìng)進(jìn)行定量定性分析(xī)，病原(yuán)微生物(wù)或(huò)病毒(dú)含量的(dí)檢測 , 比如(rú)近期(qī)流行的(dí)甲(jiǎ)型(xíng)H1N1流感， 轉基因(yīn)動(dòng)植物基(jī)因(yīn)拷(kǎo)貝(bèi)數的檢(jiǎn)測(cè)，RNAi 基(jī)因失活率(shuài)的(dí)檢測等。
　　2 基(jī)因(yīn)表達差異(yì)分(fēn)析。 比(bǐ)較(jiào)經過不(bù)同(tóng)處(chǔ)理樣(yàng)本(běn)之(zhī)間(jiān)特定基因的(dí)表(biǎo)達差(chà)異(yì) ( 如藥物處理，物理處理，化(huà)學處理等(děng) ) ，特(tè)定基因在不同時相的(dí)表(biǎo)達差(chà)異以(yǐ)及(jí)cDNA芯片或(huò)差(chà)顯(xiǎn)結果的確(què)證
　　3 SNP 檢(jiǎn)測(cè)。檢測單核苷(gān)酸多態性(xìng)對於研究個體(tǐ)對(duì)不(bù)同疾病(bìng)的(dí)易感(gǎn)性(xìng)或者(zhě)個(gè)體對(duì)特(tè)定藥物(wù)的(dí)不同(tóng)反(fǎn)應有著(zhuó)重(zhòng)要(yào)的(dí)意(yì)義(yì)，因分(fēn)子信(xìn)標結構的巧妙性(xìng)，一(yī)旦SNP 的(dí)序列信息(xī)是已(yǐ)知(zhī)的(dí)，采用這(zhè)種技術(shù)進行高通(tōng)量(liáng)的 SNP 檢(jiǎn)測將會變(biàn)得簡單而準確(què)。
　　4 甲基(jī)化檢(jiǎn)測。甲(jiǎ)基化同(tóng)人類的(dí)許(xǔ)多疾病(bìng)有(yǒu)關，特(tè)別(bié)是(shì)癌症(zhèng)， Laird 報道了(liǎo)一種稱(chēng)作(zuò) Methylight的技術，在擴增(zēng)之前先處理 DNA ，使得未(wèi)甲基(jī)化的胞嘧啶(dìng)變成(chéng)尿嘧(mì)啶(dìng)，而甲基(jī)化的(dí)胞嘧(mì)啶不受影響(xiǎng)，用(yòng)特異性的引(yǐn)物和(hé) Taqman探針來區分(fēn)甲基(jī)化和非甲基化的(dí) DNA ，這種方法(fǎ)不僅(jǐn)方(fāng)便(biàn)而且(qiě)靈(líng)敏(mǐn)度更(gēng)高。
　　醫(yī)學研究
　　5 產前診(zhěn)斷：人們(mén)對遺傳(chuán)性物質改(gǎi)變(biàn)引(yǐn)起(qǐ)的遺傳(chuán)性(xìng)疾病還無(wú)法治療(liáo)，到(dào)目前為止，還(huán)隻能隻(zhī)能(néng)通過產(chǎn)前(qián)監測(cè)，減少病嬰出生(shēng)，以(yǐ)防止各類遺傳(chuán)性(xìng)疾病的發生，如為(wéi)減(jiǎn)少(shǎo)X連鎖遺(yí)傳(chuán)病患(huàn)兒的出生(shēng)，從孕(yùn)婦(fù)的(dí)外(wài)周血(xiě)中(zhōng)分離胎(tāi)兒DNA，用(yòng)實時(shí)熒光定(dìng)量(liáng)PCR檢(jiǎn)測(cè)其Y性別(bié)決定(dìng)區基因是(shì)一(yī)種無(wú)創傷性的方法，易為(wéi)孕婦所接受。
　　6 病(bìng)原(yuán)體檢測：采(cǎi)用熒光定量PCR檢測技術可以對淋(lín)球(qiú)菌，沙眼衣原(yuán)體(tǐ)，解(jiě)脲支(zhī)原體(tǐ)，人(rén)類乳頭瘤(liú)病毒，單(dān)純皰(pào)疹(zhěn)病(bìng)毒，人(rén)類免(miǎn)疫(yì)缺(quē)陷病(bìng)毒，肝炎病毒，流(liú)感病毒(dú)，結(jié)核(hé)分枝杆(gān)菌，EB病(bìng)毒和巨細胞病(bìng)毒(dú)等病原(yuán)體(tǐ)進(jìn)行(háng)定(dìng)量測定。與傳(chuán)統的(dí)檢測方法相比具有靈(líng)敏(mǐn)度高，取樣少(shǎo)，快速(sù)簡便等(děng)優點。
　　7 藥(yào)物(wù)療效考核(hé)：對乙型(xíng)肝炎病(bìng)毒 (HBV)，丙型肝炎病(bìng)毒(dú) (HCV) 定量分析顯示(shì)：病(bìng)毒(dú)量與(yǔ)某(mǒu)些藥物(wù)的療效(xiào)關(guān)係。HCV高(gāo)水平表(biǎo)達(dá)，幹擾(rǎo)素治療作用不(bù)敏感，而(ér)HCV低滴度，幹擾(rǎo)素作(zuò)用敏感；在(zài)拉米夫(fū)定治(zhì)療(liáo)過(guò)程(chéng)中，HBV- DNA的血清(qīng)含量(liáng)曾有下(xià)降，隨後若再(zài)度上升(shēng)或超(chāo)出以前水平(píng)，則提(tí)示(shì)病毒(dú)發生變(biàn)異。
　　8 腫(zhǒng)瘤基(jī)因檢測(cè)：盡管(guǎn)腫瘤發(fā)病(bìng)的(dí)機理(lǐ)尚(shàng)未(wèi)清(qīng)楚(chǔ)，但相(xiāng)關基因發生突變(biàn)是(shì)致癌性(xìng)轉(zhuǎn)變(biàn)的(dí)根本(běn)原(yuán)因已被廣泛接受。癌基因的表(biǎo)達(dá)增(zēng)加和(hé)突變(biàn)，在(zài)許多腫瘤早期就(jiù)可(kě)以(yǐ)出現。實時(shí)熒(yíng)光定(dìng)量 PCR不(bù)但(dàn)能有(yǒu)效地檢(jiǎn)測到(dào)基因(yīn)的(dí)突(tū)變(biàn)，而且可(kě)以準確(què)檢(jiǎn)測癌基因的表達量。目(mù)前用此方(fāng)法(fǎ)進行過端(duān)粒酶(méi)hTERT基(jī)因，慢(màn)性粒(lì)細(xì)胞性白(bái)血病WT1基(jī)因，腫瘤 ER基因，前列腺癌PSM基因(yīn)，腫瘤(liú)相關(guān)的病毒基(jī)因(yīn)等(děng)多種基(jī)因(yīn)的(dí)表達(dá)檢(jiǎn)測。