miRNA定(dìng)量檢測行業(yè)熱(rè)度不(bù)減

 　　miRNA檢(jiǎn)測(cè)行(háng)業熱(rè)度不減(jiǎn)
　　MicroRNAs （miRNAs）是一(yī)種(zhǒng)存在於(yú)真核(hé)生物的(dí)內(nèi)源(yuán)性非編(biān)碼(mǎ)小(xiǎo)RNA，具有抑(yì)製(zhì)靶向mRNA轉(zhuǎn)錄，翻譯或(huò)者剪切靶(bǎ)向mRNA並促使其(qí)降解(jiě)的(dí)功能(néng)。它(tā)會組裝(zhuāng)進入沉(chén)默復(fù)合體（RISC），識別(bié)並(bìng)與靶向mRNA互補(bǔ)配(pèi)對(duì)，從(cóng)而降(jiàng)解(jiě)或(huò)者阻(zǔ)止mRNA翻譯(yì)。
　　miRNAs負(fù)責(zé)調控(kòng)多(duō)種(zhǒng)生(shēng)理(lǐ)過程，包(bāo)括(kuò)細胞(bāo)周期(qī)（發育(yù)，遷(qiān)移(yí)和(hé)凋(diāo)亡），幹細(xì)胞分(fēn)化，免疫調節，代謝(xiè)控製，神(shén)經發(fā)育(yù)，病毒(dú)復製(zhì)等(děng)等。這意(yì)味著(zhuó)，它(tā)與(yǔ)多種(zhǒng)疾病有(yǒu)關(guān)聯。miRNAs存在(zài)於許多常(cháng)用組織樣(yàng)本中(zhōng)，包括(kuò)血(xiě)漿，血清，唾液以(yǐ)及尿(niào)液，且高度穩(wěn)定(dìng)，可(kě)以(yǐ)作為(wéi)生物(wù)標(biāo)記(jì)物用於多種疾病(bìng)的(dí)診斷(duàn)，例如癌(ái)症，神(shén)經性(xìng)衰退疾(jí)病，心血管疾病和自身免(miǎn)疫性(xìng)疾病。
　　此外(wài)，相比(bǐ)於其他(tā)生物(wù)分子，miRNAs更具有(yǒu)組(zǔ)織特異(yì)性(xìng)，且(qiě)能(néng)夠穿(chuān)過血腦(nǎo)屏障，從而可以成為(wéi)檢測大腦健(jiàn)康的生物標(biāo)記物(wù)，用(yòng)於檢測多種(zhǒng)神經類(lèi)疾病，包(bāo)括(kuò)多發(fā)性硬化症，阿爾茲(zī)海(hǎi)默(mò)症和帕(pà)金森症。
　　基於(yú)上述優勢(shì)，科研機(jī)構(gòu)以及醫(yī)藥企(qǐ)業開始(shǐ)轉(zhuǎn)向開發基於miRNAs的檢測(cè)技(jì)術和服務項目，它(tā)們能(néng)夠(gòu)為(wéi)疾病診(zhěn)斷，防(fáng)治提(tí)供更快捷的過程(chéng)和手(shǒu)段。而且(qiě)，這(zhè)些(xiē)優勢將會推動生命科學領(lǐng)域(yù)對(duì)miRNAs檢(jiǎn)測的(dí)需(xū)求。Kalorama Information公司調研報(bào)告(gào)指(zhǐ)出，2015年(nián)miRNAs檢(jiǎn)測及(jí)服(fú)務市場價(jià)值約達(dá)到(dào)4.07億美(měi)元。而且，根據GEN報道，基於miRNAs的檢測技術(shù)和服務(wù)至(zhì)少(shǎo)在未(wèi)來5年內都將是一(yī)個熱(rè)門(mén)領域。
　　miRNAs檢測(cè)技術(shù)
　　目(mù)前(qián)，miRNAs檢(jiǎn)測技術主要包括qRT-PCR，微陣列（microarray），高通量測序(xù)技術（NGS）
　　首(shǒu)先，定(dìng)量即時聚合酶鏈(liàn)鎖(suǒ)反應（qRT-PCR）能(néng)夠(gòu)借助熒(yíng)光(guāng)染(rǎn)劑(jì)測(cè)量每次PCR循環後(hòu)擴增(zēng)的核酸(suān)總量。但是(shì)它(tā)在靈(líng)敏度(dù)，重復(fù)性(xìng)等(děng)方(fāng)麵存(cún)在局(jú)限(xiàn)性。
　　而微陣列則是實現基因表(biǎo)達信息(xī)快速檢測的(dí)重(zhòng)要技(jì)術，具有(yǒu)易於操作(zuò)，成(chéng)本較(jiào)低，準確率提高等優(yōu)點，適(shì)用(yòng)於大(dà)規(guī)模miRNAs檢測。但是它依然在靈敏(mǐn)度上(shàng)有(yǒu)所欠(qiàn)缺(quē)，不能挖掘未知的(dí)miRNAs。但是(shì)，仍(réng)然有(yǒu)不少企(qǐ)業正(zhèng)在開(kāi)發miRNAs微陣(zhèn)列檢測(cè)技術，包括Affymetrix，Agilent，Thermo Fisher 和(hé)Illumina等等。
　　隨著(zhuó)測(cè)序技術，儀器，成本的更(gēng)新(xīn)優化(huà)，高通(tōng)量(liáng)測序技(jì)術(shù)也逐漸(jiàn)成為(wéi)量化分析miRNAs的(dí)熱門手(shǒu)段。包括(kuò)Illumina的 MiSeq，Thermo的Ion Personal Genome Analyzer以及Ion S5 在內(nèi)的(dí)測序(xù)平(píng)台(tái)讓(ràng)miRNAs大樣本分析(xī)變(biàn)得更(gēng)易實(shí)現。
　　NGS的(dí)優勢(shì)在(zài)於(yú)測序(xù)通(tōng)量大，靈(líng)敏度高，重(zhòng)復(fù)性好(hǎo)，且(qiě)能夠檢測(cè)未(wèi)知(zhī)基(jī)因(yīn)，提供(gōng)定量定性(xìng)分析(xī)等(děng)等。但(dàn)是，它在(zài)miRNAs分析應用(yòng)上依然存在缺陷(xiàn)，例如樣本製(zhì)備標準(zhǔn)高(gāo)，定(dìng)量準確(què)性不(bù)高(gāo)，成(chéng)本(běn)相對較高(gāo)，復雜性增強(qiáng)以及(jí)儀器，試劑，數據(jù)分(fēn)析(xī)軟(ruǎn)件(jiàn)涉及不同(tóng)的(dí)供(gōng)應(yīng)商增(zēng)加(jiā)了工作(zuò)流(liú)程(chéng)的(dí)繁(fán)瑣性(xìng)。特別是，針(zhēn)對(duì)miRNAs分析的樣本製(zhì)備需要遵循特(tè)定(dìng)的(dí)步驟，以減少(shǎo)引物(wù)二聚(jù)體的形(xíng)成。
　　miRNAs功能(néng)研(yán)究
　　“miRNA Mimics”，“miRNA inhibitor”是研究miRNAs功(gōng)能(néng)的(dí)典(diǎn)型“工具包”。
　　其(qí)中(zhōng)，“miRNA Mimics”是一(yī)種通過(guò)化學修飾(shì)寡核苷酸(suān)的(dí)方(fāng)法(fǎ)合(hé)成而來的(dí)能夠模擬生物(wù)內源(yuán)miRNAs的(dí)小RNA分子。它會(huì)進一步(bù)增(zēng)強(qiáng)內(nèi)源(yuán)性miRNA的(dí)沉(chén)默功(gōng)能(néng)，從而(ér)降(jiàng)低蛋(dàn)白(bái)質表達(dá)，進行功能獲得性(xìng)（gain-of-function）研究(jiū)。
　　而“miRNA inhibitor”同樣(yàng)也是化學合(hé)成而(ér)來，它可以特異(yì)地靶(bǎ)向和(hé)敲(qiāo)除單(dān)個miRNA分(fēn)子，從而(ér)削弱內源(yuán)miRNA的(dí)基因(yīn)沉默(mò)效應(yīng)，提高(gāo)蛋白表達量，進(jìn)行功能(néng)缺失性(xìng)（loss-of-function）研究(jiū)。
　　Mimics 和inhibitors實驗可(kě)以(yǐ)同(tóng)時進行驗證miRNA的(dí)生(shēng)物學(xué)功能。目前，包括(kuò)Thermo，Dharmacon，Exiqon，Integrated DNA Technologies，Qiagen，MilliporeSigma在內的多家(jiā)公司(sī)都在開發(fā)，生(shēng)產(chǎn)miRNA功能(néng)驗(yàn)證試劑盒(hé)。
　　miRNA檢測技(jì)術和(hé)服務(wù)市(shì)場(cháng)分析
　　隨(suí)著基礎研究(jiū)的深(shēn)入(rù)，應用(yòng)技(jì)術的創新(xīn)，臨床(chuáng)轉(zhuǎn)化的推廣，miRNA分析及服(fú)務依(yī)然是(shì)一(yī)個充滿(mǎn)活(huó)力(lì)和前景(jǐng)的(dí)行(háng)業。眾多(duō)生(shēng)物科(kē)技公(gōng)司在該領域(yù)布局(jú)，承擔著不同(tóng)產品(pǐn)的開發(fā)和生(shēng)產，包(bāo)括miRNA特定qRT-PCR 試劑，微(wēi)陣列，生物標(biāo)記(jì)試劑，NGS文(wén)庫(kù)構(gòu)建盒，功能(néng)驗證試(shì)劑(jì)盒等(děng)。
　　該領(lǐng)域(yù)的(dí)領頭*包括(kuò)Thermo Fisher，Exiqon，Dharmacon，Qiagen，Illumina。市場競(jìng)爭(zhēng)力主(zhǔ)要依賴於(yú)產品的(dí)質量和性(xìng)能(néng)，所以(yǐ)產品(pǐn)或者技術是否(fǒu)能(néng)夠滿足(zú)科研，臨床應用至關重(zhòng)要(yào)。