細胞(bāo)係(xì)鑒定(dìng)錯誤的根源 大(dà)部分(fēn)的(dí)細胞係(xì)在(zài)學(xué)術環(huán)境(jìng)中被建立,在學(xué)術環境(jìng)下,組(zǔ)織(zhī)培養(yǎng)通(tōng)常(cháng)被(bèi)認為是一種對(duì)技(jì)能少(shǎo)有要求(qiú)的(dí)技(jì)術,其所用到(dào)的(dí)必(bì)要設(shè)備如(rú)流(liú)動櫃和孵育(yù)箱(xiāng)使(shǐ)用起(qǐ)來(lái)沒(méi)什(shí)麼(mó)限製。在這些(xiē)情(qíng)況(kuàng)下,嘗試(shì)建立(lì)一種新的(dí)細(xì)胞(bāo)係通(tōng)常會導致(zhì)交叉汙染(rǎn)是(shì)不足(zú)為(wéi)怪的(dí)。在(zài)送(sòng)至(zhì)德國(guó)的微生(shēng)物(wù)和細胞(bāo)培(péi)養收(shōu)藏(cáng)所的550個(gè)個白血病(bìng)和淋(lín)巴(bā)瘤細(xì)胞(bāo)係中,59/395(15%)被(bèi)初(chū)創者送來(lái)的細(xì)胞係以及23/155(15%)的(dí)二(èr)級(jí)來(lái)源(yuán)是(shì)錯(cuò)誤(wù)的。可以(yǐ)推(tuī)測(cè)大部(bù)分(fēn)二(èr)級來(lái)源(yuán)的細(xì)胞(bāo)係已被交叉汙染(rǎn)或(huò)被初創(chuàng)者錯(cuò)誤鑒(jiàn)定。
有許多緣由(yóu)可(kě)以引起(qǐ)細(xì)胞培(péi)養(yǎng)物錯誤(wù)鑒(jiàn)定(dìng),每一個(gè)實驗室都存(cún)在風險(xiǎn)。或許(xǔ)細(xì)胞錯誤(wù)鑒定zui直(zhí)接的原因(yīn)就是在(zài)常規(guī)操(cāo)作(zuò)過程中對細胞培養容(róng)器(qì)進(jìn)行(háng)了錯誤(wù)標記(jì)。造(zào)成這種問題出現(xiàn)的原(yuán)因有(yǒu):實驗員(yuán)的工(gōng)作負荷(hé),缺乏(fá)注意以(yǐ)及在細胞(bāo)操(cāo)作(zuò)過程中的(dí)分心。
培(péi)養物(wù)的交(jiāo)叉汙染以及隨後(hòu)汙染(rǎn)細胞的(dí)過(guò)量生(shēng)長是另一(yī)個引起細胞(bāo)係(xì)錯誤(wù)鑒定(dìng)的(dí)常見(jiàn)原因(yīn)。這種情(qíng)況發(fā)生的幾率(shuài)在以下條(tiáo)件(jiàn)會增加(jiā):試劑的(dí)共(gòng)用(yòng),在(zài)再(zài)喂養操(cāo)作時(shí)反(fǎn)復使(shǐ)用(yòng)相(xiāng)同的試管(guǎn),在沒(méi)有充分分離(lí)每一細(xì)胞類型情(qíng)況下同時對多個培(péi)養(yǎng)物(wù)進行(háng)操作(zuò)。當交叉(chā)汙(wū)染發生時(shí),一種(zhǒng)細(xì)胞類(lèi)型迅速生(shēng)長而超(chāo)過另(lìng)一(yī)種,在(zài)4-5次(cì)細胞(bāo)傳代後(hòu),一個(gè)純的(dí)汙染細胞培養(yǎng)物將(jiāng)會形成。
在使(shǐ)用(yòng)其(qí)它(tā)物種(zhǒng)的滋養(yǎng)層(céng)(例如小(xiǎo)鼠3T3細胞(bāo))來繁殖(zhí)人類(lèi)幹(gān)細胞(bāo)或原始細(xì)胞時有(yǒu)意地共培(péi)養會(huì)導致交(jiāo)叉(chā)汙染或人類(lèi)細胞(bāo)係(xì)過生(shēng)長。正(zhèng)常(cháng)情況下(xià),滋(zī)養層(céng)細胞(bāo)處(chǔ)於無增(zēng)殖狀態,但隻要(yào)生長抑(yì)製程序不(bù)*,它就(jiù)會(huì)不斷繁殖並(bìng)逐(zhú)步取(qǔ)代人類細(xì)胞。體(tǐ)細胞(bāo)雜(zá)交(jiāo)雖不(bù)常(cháng)見但也會(huì)發生,如人類套(tào)細(xì)胞淋(lín)巴瘤(liú)細胞(bāo)係(xì)NCEB-1就(jiù)攜帶了(liǎo)小鼠(shǔ)的七條(tiáo)染色體(tǐ)。
異(yì)種移植也(yě)會導致細胞係交叉(chā)汙(wū)染和錯誤鑒定(dìng),來(lái)自(zì)異(yì)種(zhǒng)移(yí)植的復蘇細胞會(huì)被宿主動物(wù)細胞(bāo)所(suǒ)替代(dài)。
一般而言(yán),交叉汙(wū)染zui終的(dí)結果(guǒ)將會是少(shǎo)量(liáng)適應(yīng)細(xì)胞(bāo)*且快速的替(tì)代。兩個細胞(bāo)係(xì)不(bù)能(néng)持(chí)續(xù)共存於(yú)同(tóng)一(yī)個培養環境,除非(fēi)它們是(shì)共生關係,但這種(zhǒng)情(qíng)況(kuàng)據我(wǒ)們所知還未(wèi)有(yǒu)報(bào)道(dào)。一個細胞群經(jīng)過(guò)許(xǔ)多次傳(chuán)代(dài)後還能包含一(yī)個穩定的混合(hé)基因(yīn)組,*已知(zhī)的情(qíng)況是接(jiē)續(xù)的體細胞雜交(jiāo)。
簡單(dān),經(jīng)濟(jì)的質(zhì)控(kòng)措施(shī)能夠(gòu)阻止或(huò)至(zhì)少會減(jiǎn)少細(xì)胞(bāo)錯誤(wù)鑒定的發(fā)生(shēng)。由(yóu)於(yú)缺(quē)乏重視及未(wèi)采(cǎi)用質控(kòng)措施(shī)導致細胞(bāo)錯(cuò)誤(wù)鑒定(dìng)現(xiàn)象極(jí)其(qí)普遍。大(dà)量(liáng)質(zhì)控措施的(dí)實(shí)行(háng)以(yǐ)及(jí)相應(yīng)文件(jiàn)的(dí)適當調整被認為是生物(wù)製(zhì)藥領域出(chū)現相對(duì)較(jiào)低細胞錯誤鑒定報(bào)道的因(yīn)素。