低速離心機(jī)製備(bèi)細(xì)胞膜(mó)試(shì)驗步(bù)驟

 低速離心機廣(guǎng)泛適(shì)用於(yú)樣(yàng)品量少(shǎo)，步驟多(duō)，離(lí)心力大，溫(wēn)度(dù)要求(qiú)不高的實(shí)驗。如(rú)
：生物(wù)化(huà)學，遺(yí)傳(chuán)工程(chéng)，農林(lín)學(xué)科(kē)，食品(pǐn)衛生，醫院和(hé)其它科研(yán)單(dān)位實驗室對(duì)樣品(pǐn)的分(fēn)離(lí)。
　　低速離心(xīn)機(jī)產品特點
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　　1，TFT真(zhēn)彩(cǎi)大(dà)屏幕觸控液(yè)晶顯示，智能(néng)化控製，可(kě)觸(chù)摸/按鍵兩(liǎng)種操作模式(shì)同時控製。
　　2，采用大力矩(jǔ)無(wú)刷(shuā)變(biàn)頻(pín)電(diàn)機驅(qū)動，特(tè)殊(shū)組合(hé)減震裝置，使(shǐ)電(diàn)機平穩(wěn)運(yùn)行(háng)。
　　3，運(yùn)行參(cān)數自動記(jì)錄(lù)，可(kě)RCF直接啟(qǐ)動。
　　4，設有(yǒu)三層(céng)鋼套保(bǎo)護，運(yùn)行安全可靠(kào)。
　　5，可(kě)提供(gōng)20種(zhǒng)工作模(mó)式(shì)選(xuǎn)擇(zé)，可自由編程，調(tiáo)用。
　　6，點動功能，短暫離心。
　　7，10檔加速(sù)/減(jiǎn)速速(sù)率(shuài)控(kòng)製(zhì)
　　低速離(lí)心(xīn)機製備(bèi)細胞(bāo)膜的分(fēn)離(lí)實驗
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　　試劑(jì)
：生理鹽水，0.25mol/L 蔗糖溶液(yè)（含0.3mol/LCacl2），0.34mol/L 蔗糖(táng)溶液（含0.3mol/LCacl2）；器件
：常(cháng)規的(dí)分離(lí)細(xì)胞(bāo)膜(mó)的(dí)。
　　1）取空腹(fù)12h雄鼠(shǔ)（150g),斷(duàn)頭處死(sǐ)，放血(xiě)。解剖(pōu)取肝髒，迅(xùn)速用(yòng)生(shēng)理(lǐ)鹽水(shuǐ)洗(xǐ)淨，用濾紙吸(xī)幹。取3g肝(gān)髒(zàng)剪(jiǎn)碎(suì)，經(jīng)冷的(dí)0.25mol/L 蔗糖溶液洗滌(dí)數次，加(jiā)18ml預冷0.25mol/L 蔗糖(táng)溶(róng)液匀(yún)漿，用雙層尼(ní)龍膜過(guò)濾，備用。
　　2）將匀漿(jiāng)的(dí)放入離心(xīn)管中(zhōng)，沿壁小(xiǎo)心(xīn)加(jiā)入等(děng)體積(jī)的(dí)0.34mol/L 蔗(zhè)糖(táng)溶液(yè)覆蓋(gài)於樣品上，以(yǐ)700g離(lí)心10min.
　　3）將離心(xīn)沉(chén)澱以0.25mol/L 蔗糖溶(róng)液(yè)洗滌， 1000g（3500r/min）離心10min，重復一(yī)次(cì)。
　　4）離(lí)心後沉(chén)澱為細胞核(hé)，其(qí)上有(yǒu)一(yī)較疏鬆的上層(céng)，小(xiǎo)心吸(xī)出此上層，懸(xuán)於密度d20為(wéi)1.16的蔗糖(táng)溶(róng)液（51g/L)中，移(yí)入離(lí)心(xīn)管(guǎn)，沿壁加(jiā)密(mì)度d20為1.18的蔗(zhè)糖溶(róng)液（51.5g），覆蓋在樣品(pǐn)層(céng)上層。700g（3000r/min）離心(xīn)10min，細(xì)胞膜組(zǔ)分位(wèi)於兩層溶液(yè)界(jiè)麵(miàn)，小心吸出(chū)，置低溫(wēn)保(bǎo)存，以(yǐ)備進一步(bù)分析(xī)。