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為(wéi)什麼(mó)要進行細(xì)胞鑒(jiàn)定?

  • 發布日期:2021-01-26      瀏覽(lǎn)次數:2135
    •   為(wéi)什(shí)麼要(yào)進(jìn)行(háng)細胞鑒定(dìng)?
        1.什(shí)麼是(shì)細胞係鑒定(dìng)?
        所(suǒ)謂(wèi)細(xì)胞係鑒(jiàn)定(dìng)即通(tōng)過(guò)STR(短串聯重復(fù))圖譜所建(jiàn)立細胞係的遺傳特(tè)征。一株(zhū)細(xì)胞係(xì)的遺傳(chuán)特(tè)征(zhēng)確(què)立後(hòu),細胞係可(kě)以通(tōng)過定(dìng)期的檢(jiǎn)測(cè),以(yǐ)防止(zhǐ)出現(xiàn)細(xì)胞(bāo)係被誤認或交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)的情(qíng)況(kuàng)。
        2.為什(shí)麼要進行細(xì)胞(bāo)係鑒(jiàn)定(dìng)?
        首先(xiān)進行細胞(bāo)係STR鑒定是(shì)很重要的(dí)。很多生物醫(yī)藥的研(yán)究都(dū)采(cǎi)用(yòng)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)來進行,這(zhè)些(xiē)細胞可能(néng)是受贈於(yú)其它(tā)研(yán)究人員,也可(kě)能是從(cóng)細胞庫(kù)(如美(měi)國ATCC,AmericanTypeCultureCollection)得來。據估(gū)計,15-20%的實驗(yàn)室,實驗中所使用的(dí)細胞已經(jīng)不是原來(lái)的(dí)細胞係(xì),或者與其它細胞係發(fā)生了交(jiāo)叉汙染。顯(xiǎn)然(rán),細(xì)胞係遭(zāo)到(dào)汙(wū)染,特征鑒別(bié)錯誤,將會(huì)極大(dà)的(dí)威(wēi)脅(xié)著基(jī)於這些(xiē)細胞而(ér)發表(biǎo)的論文(wén)質(zhì)量(liáng)和研(yán)究發(fā)現的正確性(xìng)。為此(cǐ),很多細胞庫(kù)現(xiàn)在(zài)都要對(duì)提交來(lái)的細胞(bāo)係(xì)進(jìn)行鑒(jiàn)定,並對細胞係之(zhī)間(jiān)的交叉(chā)汙染進(jìn)行監測(cè)。
        現在(zài)很(hěn)多機(jī)構都(dū)已經認識到這個的(dí)重要(yào)性,ATCC和(hé)FDA,這(zhè)些機構要求對(duì)用於(yú)製藥領域的實驗(yàn)中所(suǒ)使用的(dí)材(cái)料—諸(zhū)如(rú)細(xì)胞係—應該(gāi)進(jìn)行“身份鑒(jiàn)定”和純(chún)度測試。很(hěn)多(duō)雜(zá)誌也(yě)要求(qiú)使(shǐ)用(yòng)細(xì)胞係的文(wén)章(zhāng)提(tí)供STR指(zhǐ)紋圖譜(pǔ)數據(jù)。
        FDA建議(yì)研(yán)究(jiū)人(rén)員在(zài)培養(yǎng)細(xì)胞的(dí)較早階(jiē)段(細胞(bāo)培養第一(yī)周)來鑒(jiàn)定(dìng)細胞(bāo)係的身份(fèn)。細胞在被凍(dòng)存前應(yīng)再一次進行(háng)鑒定;對(duì)於(yú)活(huó)躍(yuè)生長的細胞(bāo),每兩(liǎng)個(gè)月(yuè)應(yīng)鑒定(dìng)一(yī)次;文(wén)獻發(fā)表前也應對細(xì)胞(bāo)係(xì)身(shēn)份(fèn)進行(háng)鑒(jiàn)定。
        如(rú)果一個實驗室使用不(bù)止一(yī)種(zhǒng)細(xì)胞(bāo)係,則(zé)應在(zài)實驗開(kāi)始時,就要(yào)對(duì)所(suǒ)有的細胞(bāo)係(xì)進行鑒定(dìng),以便(biàn)排除(chú)交叉(chā)汙(wū)染。
        這樣將(jiāng)減(jiǎn)少(shǎo)由於細胞(bāo)係發(fā)生交叉汙(wū)染或(huò)身份誤認,將導致(zhì)實(shí)驗數(shù)據(jù)的無效或(huò)數據(jù)誤導。
        3.如何(hé)進(jìn)行細胞(bāo)係(xì)鑒定?
        細胞(bāo)係(xì)鑒定目前主(zhǔ)要基於身份認(rèn)證委(wěi)員(yuán)會的標準。依(yī)據該(gāi)標準(zhǔn),可以通(tōng)過(guò)多重熒(yíng)光PCR技術,對(duì)人(rén)源(yuán)8個(gè)STR位點以(yǐ)及1個性別決定(dìng)位點(diǎn)進行(háng)檢測(cè)。
        4.什麼(mó)時(shí)候需細(xì)胞(bāo)係鑒定?
        1)當建立或獲得一個(gè)新(xīn)的細胞係時;
        2)一(yī)個涉及到(dào)細胞試驗項(xiàng)目開(kāi)始/結(jié)束時;
        3)在(zài)細胞(bāo)凍存之前(qián),或細(xì)胞已連(lián)續培(péi)養2~3個月時;
        4)發(fā)表(biǎo)文章或申請(qǐng)課題經費前;
        5)細胞係(xì)表(biǎo)現(xiàn)不穩(wěn)定(dìng)或(huò)結(jié)果與預期(qī)差(chà)別(bié)較(jiào)大(dà)時;
        6)當實驗室使用(yòng)超過(guò)一種細(xì)胞係(xì)時(shí),所(suǒ)有細胞係(xì)先鑒定以排除(chú)交叉汙染(rǎn)的可(kě)能(néng)。