熒光定(dìng)量中定量(liáng)與相對定量(liáng)有什麼區(qū)別(bié)？

　　熒(yíng)光定(dìng)量中(zhōng)定量(liáng)與相(xiāng)對定量有什麼區(qū)別？
　　熒光(guāng)定(dìng)量通(tōng)過(guò)熒光染料(liào)或熒光(guāng)標記的特異性(xìng)的(dí)探針(zhēn)
，對PCR產物進行(háng)標(biāo)記跟蹤
，實(shí)時在綫監控(kòng)反應過程(chéng)
，結(jié)合(hé)相(xiāng)應的軟(ruǎn)件可以對產物進行(háng)分析
，計算(suàn)待(dài)測樣(yàng)品模板(bǎn)的(dí)初(chū)始濃度(dù)。
　　定(dìng)量(liáng)的(dí)目的(dí)是(shì)測定(dìng)目的(dí)基因在(zài)樣本(běn)中(zhōng)的分子(zǐ)數目
，即通(tōng)常所(suǒ)說的(dí)拷貝(bèi)數。相對定(dìng)量的目(mù)的是測(cè)定(dìng)目(mù)的基因(yīn)在(zài)兩個或(huò)多(duō)個樣本中的(dí)含量的相(xiāng)對比例
，而不(bù)需(xū)要知道(dào)它(tā)們在(zài)每個(gè)樣(yàng)本中的拷貝(bèi)數。
　　舉(jǔ)例來說
，如(rú)果(guǒ)研(yán)究項目中(zhōng)包括(kuò)處(chǔ)理過的和未經處理的對照樣(yàng)本(běn)
，通常(cháng)可以將未(wèi)經處(chǔ)理(lǐ)的(dí)樣本(běn)為基準
，規(guī)定(dìng)其目的(dí)基因濃度為100%
，將經(jīng)處(chǔ)理的樣本(běn)的(dí)定量結果(guǒ)除以(yǐ)對照樣(yàng)品的定量結果
，就可(kě)以計(jì)算各(gè)個處理樣本(běn)的(dí)基因(yīn)含量相(xiāng)對(duì)於未處(chǔ)理樣(yàng)品的(dí)百(bǎi)分比。
　　定量(liáng)實驗必(bì)須使(shǐ)用(yòng)已知(zhī)拷(kǎo)貝數(shù)的標(biāo)準品(pǐn)
，必(bì)須做標(biāo)準曲綫。相(xiāng)對定(dìng)量可以(yǐ)做(zuò)標(biāo)準(zhǔn)曲綫(xiàn)
，也可(kě)以(yǐ)不做(zuò)標(biāo)準(zhǔn)曲(qū)綫(xiàn)。
　　相對(duì)定量實驗有兩種方法：標準曲(qū)綫法和CT值比(bǐ)較法(fǎ)。如果使用標(biāo)準曲綫法
，可(kě)以使(shǐ)用標(biāo)準品
，也(yě)可以使用相對(duì)標(biāo)準品
，而且相對標(biāo)準(zhǔn)品(pǐn)在實(shí)驗操作上(shàng)更為簡便易(yì)行。相對標準品是隻(zhī)知(zhī)道樣品中DNA或RNA的稀釋比例(lì)而(ér)不(bù)需要知(zhī)道(dào)其分子數目(mù)的(dí)標準(zhǔn)品(pǐn)
，典型的做(zuò)法是將(jiāng)一(yī)個已知(zhī)pg數的(dí)樣(yàng)品(pǐn)做一(yī)係(xì)列梯度稀(xī)釋(shì)。
　　CT值(zhí)比較法是利(lì)用CT值(zhí)與起始(shǐ)DNA濃度(dù)的(dí)對數成(chéng)反比的數學(xué)關(guān)係
，來(lái)計算不(bù)同(tóng)樣本(běn)之間的相(xiāng)對百(bǎi)分比
，其計算公式(shì)是。
　　定(dìng)量的數據易於理(lǐ)解
，但是標準品的製(zhì)備(bèi)和(hé)測定其DNA含(hán)量比較(jiào)困(kùn)難。有許多商(shāng)業(yè)性的標(biāo)準(zhǔn)品試劑(jì)盒(hé)供(gōng)選購
，可以(yǐ)解決這種(zhǒng)困難。
　　相對定量的標準(zhǔn)品(pǐn)容易在(zài)實驗室(shì)裏(lǐ)自己製備
，但是(shì)數(shù)據(jù)處(chǔ)理比(bǐ)較(jiào)麻(má)煩
，對實驗(yàn)數(shù)據的(dí)解釋有一定難(nán)度。