透析胎牛(niú)血(xiě)清(qīng)是否(fǒu)需要做滅活(huó)處理(lǐ)?
透析胎牛血(xiě)清(qīng)進行(háng)培養細胞(bāo)時(shí),除了血清還(huán)需(xū)要(yào)添(tiān)加(jiā)基(jī)礎(chǔ)培養基,混合(hé)成(chéng)為(wéi)*培養基,基(jī)礎培養(yǎng)基是成(chéng)分(fēn)確定且知其確切含(hán)量的,可(kě)以補(bǔ)充(chōng)血清(qīng)中缺乏的(dí)營養元(yuán)素,基(jī)礎培養基(jī)一(yī)般含有氨基酸,無機鹽,維(wéi)生素,含碳物(wù)質,蛋白和其他營養元素,每(měi)種成(chéng)分對於細(xì)胞存活(huó),代謝(xiè)等功(gōng)能(néng)都(dū)有(yǒu)不同(tóng)影(yǐng)響,不(bù)同細(xì)胞係需要的(dí)成(chéng)分含量(liáng)也不(bù)同(tóng),因(yīn)此市(shì)麵上會(huì)存在各類(lèi)培(péi)養基配方,如DMEM,RPMI-1640,M-199,MEM等,基礎培(péi)養(yǎng)基(jī)也(yě)需要根據自己培養的(dí)細胞(bāo)種(zhǒng)類進(jìn)行更(gēng)合適(shì)的(dí)選擇(zé)。
自行配製基礎(chǔ)培(péi)養基時,需要(yào)注意是(shì)否(fǒu)需(xū)另外添加(jiā)營養(yǎng)物或必(bì)需物至(zhì)培養基中(如(rú):碳酸氫鈉)並調(tiáo)整pH值。使用(yòng)不適合的(dí)培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,細胞(bāo)仍可(kě)生長(cháng)但(dàn)特(tè)性會改(gǎi)變(biàn)。培(péi)養(yǎng)基(jī)中(zhōng)常用(yòng)的(dí)酚紅(pH指(zhǐ)示劑)本身有微弱(ruò)雌(cí)激(jī)素作用,會(huì)刺(cì)激(jī)具有雌(cí)激(jī)素(sù)受(shòu)器的(dí)細胞生(shēng)長(cháng)。
透(tòu)析(xī)胎牛血清是(shì)在(zài)對懷孕八(bā)個(gè)月(yuè)的(dí)母(mǔ)牛直(zhí)接(jiē)進(jìn)行(háng)心髒穿刺取(qǔ)血(xiě)得出(chū)的血(xiě)清,而小牛(niú)血(xiě)清(qīng)是(shì)在小牛出生(shēng)後(hòu)一天之(zhī)內(nèi)通過靜(jìng)脈(mài)采血所(suǒ)得到的血清。這兩(liǎng)種采集(jí)方式是(shì)有著根本(běn)區別的(dí),通過(guò)采(cǎi)集的(dí)方(fāng)式(shì)便(biàn)可(kě)以(yǐ)得(dé)知(zhī)胎牛血清對相(xiāng)關的胎牛(niú)質量(liáng)要求更高(gāo),因此(cǐ)所(suǒ)提取(qǔ)得血清(qīng)材質效果更(gēng)好(hǎo)對(duì)細胞培(péi)養的(dí)夠提(tí)供(gōng)更穩定的性能(néng)。在胎牛(niú)血清(qīng)和小牛(niú)血(xiě)清(qīng)的提取(qǔ)中所需要的工(gōng)藝(yì)和成本大有不(bù)同,因而(ér)製作(zuò)而成的(dí)胎(tāi)牛血(xiě)清與小(xiǎo)牛血清之間的(dí)價格(gé)也(yě)存(cún)在(zài)著(zhuó)較大(dà)的差異(yì)。
透(tòu)析胎(tāi)牛(niú)血(xiě)清是(shì)否(fǒu)需(xū)要做(zuò)滅活處理?這取(qǔ)決(jué)於(yú)您的應用。
滅(miè)活過程中,會(huì)導(dǎo)致血(xiě)清中(zhōng)某些成分被破壞,如(rú)氨(ān)基酸,維(wéi)生素(sù),生長(cháng)因(yīn)子等(děng)。所以(yǐ)隻有在您的實驗對血清有(yǒu)特(tè)殊要求(qiú)時,才(cái)會(huì)考(kǎo)慮對(duì)血清進行(háng)滅(miè)活處理。如(rú)您的實驗(yàn)對血(xiě)清(qīng)中的某種(zhǒng)組(zǔ)分敏(mǐn)感(gǎn),需要去除(chú)該(gāi)組(zǔ)分。常見的(dí)情況(kuàng)是需(xū)要去除血(xiě)清中(zhōng)的(dí)補體蛋(dàn)白,因(yīn)為補(bǔ)體(tǐ)在機體中參與細胞(bāo)殺傷(shāng),巨噬(shì)細胞和淋巴細胞活(huó)化(huà),肥(féi)大細(xì)胞和血小板(bǎn)組胺釋放,平滑肌收縮(suō)等(děng)過程,所(suǒ)以一般(bān)在免疫學相關研(yán)究中及(jí)肌細胞(bāo)和(hé)幹細(xì)胞的(dí)培(péi)養過(guò)程中(zhōng)需要對(duì)血清進(jìn)行滅活(huó)處理(lǐ)。