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血清沉澱(diàn)會影響細(xì)胞培(péi)養(yǎng)嗎?怎麼避免沉澱

  • 發(fā)布日(rì)期:2021-12-15      瀏覽次(cì)數:1779
    •   血清(qīng)沉澱會影(yǐng)響細胞(bāo)培養(yǎng)嗎?
        1.細胞生長
        我們在出廠前都會對血(xiě)清(qīng)進(jìn)行(háng)一係列質檢(jiǎn)測(cè)試,確保(bǎo)血(xiě)清質量(liáng)達(dá)到嚴格(gé)標(biāo)準(zhǔn)。血清(qīng)測試(shì)和細胞培養經(jīng)驗(yàn)也表(biǎo)明(míng),其沉(chén)澱(diàn)成分不會(huì)影響血清(qīng)作為細胞培養添加物(wù)的表現。這一(yī)點得到(dào)了(liǎo)眾(zhòng)多客戶和(hé)其他血(xiě)清(qīng)供(gōng)應商的(dí)肯定(dìng)。解凍(dòng)之後,血(xiě)清中纖維(wéi)蛋(dàn)白原(yuán)往往(wǎng)會(huì)發生凝集,形(xíng)成(chéng)肉(ròu)眼可(kě)見的沉(chén)澱。
        2.懷疑汙染
        磷酸鈣(gài)顆(kē)粒(lì)經常會(huì)被當(dāng)成(chéng)微生物汙染而(ér)引發不(bù)必要(yào)的擔(dān)憂。一般情況下(xià),當操作人員(yuán)融化(huà)血(xiě)清(qīng)後(hòu)注意到(dào)有(yǒu)霧狀渾濁時(shí),常(cháng)將其存放在(zài)4℃冰箱中(zhōng)觀察(chá),並考慮(lǜ)接下(xià)來是否繼(jì)續使(shǐ)用。但這樣會使沉澱進(jìn)一(yī)步增(zēng)多,反(fǎn)而會使血(xiě)清更加渾濁(zhuó),進而(ér)誤(wù)以(yǐ)為存在(zài)血清汙染(rǎn)。並且,在倒(dǎo)置顯微鏡(jìng)下,可在血清中觀(guān)察(chá)到四處遊動(dòng)的小(xiǎo)黑(hēi)點(磷酸(suān)鈣顆粒(lì)的(dí)布(bù)朗(lǎng)運動),更容易使(shǐ)人誤以為(wéi)存在微生(shēng)物汙染。
        為(wéi)防止這類誤解(jiě)的(dí)產生(shēng),我們不(bù)建議(yì)客戶培(péi)養血清(qīng)來驗證是(shì)否存在汙染,而(ér)是(shì)將(jiāng)血(xiě)清直接接種(zhǒng)在細菌(jūn)培養(yǎng)基(jī)上進行培養,以觀(guān)察是否(fǒu)有(yǒu)細(xì)菌(jūn)的增(zēng)殖(zhí)。並(bìng)且,進行革蘭氏(shì)染色,並(bìng)在油鏡(100X10倍)下觀察(chá)可(kě)直接(jiē)確(què)認是否(fǒu)存在(zài)微(wēi)生(shēng)物汙染。
        怎樣操(cāo)作(zuò)可以(yǐ)盡量避免沉澱出現(xiàn)?
        1.正(zhèng)確解凍
        首先(xiān),應按(àn)照逐步(bù)解(jiě)凍的(dí)方式(shì)正(zhèng)確(què)解凍血清(qīng):從(cóng)-20℃取出(chū)後,置於4℃冰(bīng)箱(xiāng)緩(huǎn)慢(màn)解凍,最後(hòu)置於(yú)室溫完成解凍(dòng)。如果(guǒ)直(zhí)接(jiē)從-20℃拿(ná)到室溫(wēn)或37℃水浴解凍,則非(fēi)常容易(yì)產生沉(chén)澱(diàn)。在解凍(dòng)過(guò)程中,請注意時不(bù)時(shí)緩慢(màn)搖晃(huǎng)瓶(píng)子(zǐ),減(jiǎn)少(shǎo)沉澱的產生。為避免反復凍(dòng)融(róng),建(jiàn)議您將血清分裝使(shǐ)用(yòng)。
        2.使用和(hé)保(bǎo)存(cún)注意(yì)事(shì)項
        血(xiě)清(qīng)沉(chén)澱(diàn)很難預(yù)測和避免,出現沉澱後(hòu)也(yě)無需擔(dān)憂(yōu),這並不會影響血清的品質(zhì)。已(yǐ)知(zhī)血清(qīng)沉(chén)澱(diàn)在(zài)以下(xià)條(tiáo)件(jiàn)下會(huì)有(yǒu)增多(duō)的可能:
        1)熱滅活;
        2)37℃培養;
        3)反復凍融(róng);
        4)伽馬(mǎ)射綫(xiàn)照(zhào)射;
        5)2-8℃長(cháng)期(qī)保存;
        6)長期保(bǎo)存(cún)於可自動化(huà)霜的(dí)冰箱中(溫(wēn)度(dù)不穩(wěn)定)。
        血清(qīng)沉澱(diàn)的(dí)形(xíng)成機理(lǐ)多(duō)種多樣,具體(tǐ)的機(jī)理(lǐ)尚不(bù)十(shí)分(fēn)明確。我們(mén)尚不(bù)能準確(què)預測(cè)和控(kòng)製血(xiě)清沉(chén)澱的(dí)產生。目前(qián)市麵上(shàng)所有品(pǐn)牌的(dí)血(xiě)清產(chǎn)品(pǐn)都(dū)存(cún)在(zài)沉(chén)澱現(xiàn)象,這一點可(kě)以(yǐ)在各(gè)品(pǐn)牌*網(wǎng)站上關(guān)於沉澱問(wèn)題(tí)的聲明上得(dé)到證實。