培(péi)養(yǎng)基是(shì)微(wēi)生物試(shì)驗的基礎,直接影響微(wēi)生物試驗(yàn)結果.適宜的培(péi)養基製(zhì)備方法,貯藏條件和(hé)質量(liáng)控製試(shì)驗(yàn)是提供(gōng)優(yōu)質培養(yǎng)基的(dí)保證.
培(péi)養(yǎng)基(jī)的製備
微生(shēng)物實驗室(shì)使(shǐ)用的(dí)培(péi)養基(jī)可(kě)按(àn)處方配製(zhì),也可使(shǐ)用(yòng)按處(chǔ)方生產的符(fú)合(hé)規定(dìng)的脫水培養基(jī).
在製備時,應(yīng)選擇質(zhì)量符合要(yào)求的脫(tuō)水培養(yǎng)基(jī)或(huò)按單獨(dú)配(pèi)方組(zǔ)分進行(háng)配製.(應附有處方(fāng)和使(shǐ)用說明(míng),配(pèi)製(zhì)時應按使用說(shuō)明上的要(yào)求(qiú)操作以確保(bǎo)質量(liáng)符(fú)合(hé)要求,結(jié)塊或顏(yán)色(sè)發生改變的(dí)脫水培養(yǎng)基(jī)不得使用.)
脫水培(péi)養(yǎng)基或單獨(dú)配(pèi)方組分應(yīng)在(zài)適當的(dí)條件(jiàn)下貯藏(cáng),如(rú)低溫,幹(gān)燥(zào)和避光,所(suǒ)用的容器(qì)應(yīng)密封,尤其(qí)是盛(shèng)放的容(róng)器.商(shāng)品(pǐn)化的成品(pǐn)培養基除了應附有處(chǔ)方和使用說(shuō)明(míng)外(wài),還應注明有(yǒu)效期(qī),貯藏條件(jiàn),適(shì)用(yòng)性檢(jiǎn)査試驗(yàn)的質(zhì)控菌(jūn)和用(yòng)途.為(wéi)保證(zhèng)質量的(dí)穩定(dìng)可(kě)靠,各(gè)脫水(shuǐ)培(péi)養基或各配(pèi)方組分應準(zhǔn)確(què)稱(chēng)量,並(bìng)要(yào)求有(yǒu)一定的精確(què)度(dù).
配(pèi)製常用的(dí)溶劑(jì)是純化(huà)水.應(yīng)記錄各稱量物的重量(liáng)和(hé)水的使用量(liáng).
配製所用容(róng)器(qì)不得(dé)影響(xiǎng)培養(yǎng)基質量,一般(bān)為(wéi)玻璃容(róng)器(qì).配製所用的(dí)容器和(hé)配套器具(jù)應潔淨(jìng),可(kě)用(yòng)純(chún)化水衝(chōng)洗以消(xiāo)除(chú)清(qīng)潔劑和(hé)外(wài)來物質的(dí)殘(cán)留(liú).對(duì)熱敏感的培養基(jī)如(rú)糖(táng)發酵培(péi)養基其分裝容器(qì)一(yī)般(bān)應(yīng)預先進行滅菌(jūn),保證無菌性(xìng).
脫(tuō)水培養(yǎng)基(jī)應(yīng)*溶(róng)解(jiě)於水中(zhōng),再(zài)行分(fēn)裝(zhuāng)與滅(miè)菌.配製(zhì)時(shí)若(ruò)需要加熱(rè)助(zhù)溶,應(yīng)注意(yì)不(bù)要過度加熱,避(bì)免培養(yǎng)基(jī)顏色變深(shēn).如需(xū)要添加其(qí)他組分(fēn)時,加人後應(yīng)充分混勻(yún).培(péi)養(yǎng)基(jī)滅(miè)菌(jūn)應(yīng)按(àn)照生產(chǎn)商提(tí)供或使用者驗證(zhèng)的參數進(jìn)行.商(shāng)品化的(dí)成品培(péi)養(yǎng)基必須附有所(suǒ)用(yòng)滅菌(jūn)方(fāng)法(fǎ)的資(zī)料(liào).
滅(miè)菌(jūn)一般采用濕熱(rè)滅(miè)菌技術(shù),特殊培養基(jī)可(kě)采(cǎi)用(yòng)薄(báo)膜(mó)過濾(lǜ)除菌.
培養(yǎng)基(jī)若采用不(bù)適當(dāng)的(dí)加熱和滅(miè)菌條(tiáo)件,有可能(néng)引起顏色(sè)變化(huà),透(tòu)明度降(jiàng)低,瓊(qióng)脂凝固(gù)力或pH值的改變(biàn).因此,培(péi)養(yǎng)基(jī)應采(cǎi)用驗證(zhèng)的(dí)滅菌程(chéng)序(xù)滅(miè)菌(jūn),滅菌(jūn)方(fāng)法(fǎ)和(hé)條件,應(yīng)通(tōng)過無(wú)菌性試驗和促生長試驗(yàn)進行驗證.此(cǐ)外(wài),對(duì)髙壓(yā)滅(miè)菌器(qì)的(dí)蒸(zhēng)汽循環係統也要加以驗(yàn)證(zhèng),以保證在一(yī)定裝載方式下的(dí)正(zhèng)常熱分(fēn)布(bù).溫度緩慢(màn)上升的高壓(yā)滅(miè)菌器(qì)可能導致(zhì)培養(yǎng)基(jī)的過(guò)熱(rè),過(guò)度(dù)滅菌可能會(huì)破(pò)壞(huài)絕大多(duō)數(shù)的(dí)細菌和真菌培養(yǎng)基促生長(cháng)的(dí)質量.滅(miè)菌(jūn)器(qì)中(zhōng)培(péi)養(yǎng)基的容(róng)積和裝(zhuāng)載方式也(yě)將(jiāng)影響加熱(rè)的速(sù)度(dù).因(yīn)此(cǐ),應(yīng)根(gēn)據滅菌(jūn)培(péi)養基(jī)的特性,進行全(quán)麵(miàn)的滅菌程序(xù)驗(yàn)證.應(yīng)確定每批(pī)培養基(jī)滅(miè)菌後的(dí)pH值(zhí)(冷(lěng)卻(què)至室(shì)溫25℃測(cè)定).如(rú)果處方(fāng)中(zhōng)未列(liè)出pH值(zhí)的範(fàn)圍(wéi),除非(fēi)經驗證(zhèng)表(biǎo)明培(péi)養基的PH值(zhí)允許的變化範(fàn)圍很寬(kuān),否則(zé),pH值(zhí)的(dí)範圍不能超過規(guī)定值(zhí)±0.2.
製成(chéng)平(píng)板或分裝(zhuāng)於試(shì)管的(dí)培(péi)養(yǎng)基(jī)應(yīng)進(jìn)行下列檢查(chá):容器和蓋子(zǐ)不得(dé)破裂(liè),裝(zhuāng)量應相同(tóng),盡(jìn)量避免形(xíng)成氣泡(pào),固體培(péi)養基表(biǎo)麵不(bù)得產生裂(liè)縫或漣漪(yī),在冷(lěng)藏(cáng)溫度下(xià)不得(dé)形成結(jié)晶,不得汙染微生物等.應(yīng)檢(jiǎn)查和記(jì)錄批數(shù)量,有效期及(jí)無(wú)菌檢(jiǎn)查.