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細(xì)胞(bāo)係(xì)的(dí)錯誤鑒定(dìng)該如(rú)何解決(jué)

  • 發(fā)布日期:2019-03-12      瀏覽(lǎn)次數:2358
    •   細(xì)胞(bāo)係對(duì)於生物醫學研(yán)究(jiū)是非常(cháng)有價值的(dí)工(gōng)具。然(rán)而,它們(mén)作為正(zhèng)常(cháng)或患病(bìng)組織(zhī)模型(xíng)的有(yǒu)效性(xìng)有賴(lài)於(yú)它(tā)們(mén)真(zhēn)的是(shì)研究人員(yuán)所認為(wéi)的組(zǔ)織類(lèi)型和(hé)物種(zhǒng)。不(bù)幸(xìng)的是,據估計(jì)常用的(dí)細胞(bāo)係中有14%~16%是被(bèi)錯(cuò)誤(wù)鑒(jiàn)別的。
        錯誤鑒別通常(cháng)源於(yú)交(jiāo)叉汙(wū)染(一(yī)種(zhǒng)培養(yǎng)物被在同一(yī)實(shí)驗(yàn)室中培養的另一(yī)種細胞係(xì)接替),也可能(néng)源於細胞(bāo)培養中的(dí)錯(cuò)誤(wù)操(cāo)作(zuò)。*,迄(qì)今為止建(jiàn)立(lì)的個人(rén)類癌細胞係HeLa細胞具(jù)有(yǒu)頑(wán)強(qiáng)的生(shēng)命(mìng)力,它(tā)們甚至(zhì)可(kě)以(yǐ)存活在(zài)氣溶膠液滴中(zhōng)並(bìng)以(yǐ)此方式(shì)汙(wū)染(rǎn)其(qí)它細胞(bāo)。由(yóu)於HeLa細胞生長得(dé)特(tè)別快,它們(mén)終會在(zài)數(shù)量上超過其(qí)它細胞。研究發(fā)現(xiàn)被錯誤(wù)鑒(jiàn)別的細胞係中有30%~50%是HeLa衍(yǎn)生(shēng)物[2,3]。對於大(dà)多數(shù)錯誤鑒別(bié)的細(xì)胞係來說,再也找(zhǎo)不(bù)到真實(shí)的儲(chǔ)備(bèi)了(liǎo)。
        盡(jìn)管從20世紀(jì)60年(nián)代以來人們已經意識(shí)到了細(xì)胞係錯誤鑒別的問(wèn)題,但這(zhè)個(gè)問(wèn)題仍(réng)然普遍存在(zài)。例如,在1968年(nián)HEp-2被(bèi)證明是HeLa(宮(gōng)頸癌細胞)衍(yǎn)生(shēng)物,但每年仍有研(yán)究(jiū)人員(yuán)將其(qí)作為(wéi)喉癌細(xì)胞(bāo)係研(yán)究並發表論文(wén)[1]。在(zài)很長一段(duàn)時(shí)間裏,期(qī)刊和資助機(jī)構都沒有適(shì)當(dāng)的政策要(yào)求科(kē)學家們對他們使(shǐ)用的細(xì)胞係進行鑒(jiàn)定(dìng)。在過(guò)去(qù)的(dí)十(shí)年(nián)中情(qíng)況(kuàng)有所(suǒ)轉變,現在(zài)越來(lái)越(yuè)多(duō)期刊(kān)要(yào)求或(huò)鼓勵作者(zhě)進行細(xì)胞係(xì)的(dí)鑒定[1,4],包括(kuò)BioMedCentral的期(qī)刊(kān),《International Journalof Cancer》,Nature出(chū)版集團(tuán)的期刊(kān)等(děng)等。由(yóu)於這類期刊(kān)數量不(bù)斷增加(jiā)且不(bù)同期刊之間要求各(gè)異(yì),因此(cǐ)在提(tí)交論文前(qián)檢查(chá)特定(dìng)期(qī)刊(kān)的(dí)指南非(fēi)常重要。例如,除(chú)了細(xì)胞係(xì)鑒定的基本要求外(wài),《Journal of Hepatology》還(huán)聲(shēng)明它將(jiāng)不再考(kǎo)慮使(shǐ)用(yòng)一些已知被(bèi)錯(cuò)誤鑒(jiàn)別(bié)的細胞係(BEL7402,SMMC7721,MHCC97L等等)。美國(guó)國(guó)立衛生研究院是將細(xì)胞係(xì)鑒定作為(wéi)資助條(tiáo)件(jiàn)的(dí)資助機構之一。
        短串(chuàn)聯重復序列(shorttandem repeat)(STR)分析法是(shì)期刊接(jiē)受(shòu)的人類細胞係鑒(jiàn)定(dìng)方法,這(zhè)是一(yī)種(zhǒng)用於法(fǎ)醫(yī)學的(dí)DNA指紋技術。它(tā)是一種(zhǒng)基(jī)於(yú)PCR的(dí)技術,該(gāi)方法(fǎ)同時測試大(dà)量(liáng)多態(tài)微衛星(xīng)位(wèi)點(diǎn)。STR分析可以(yǐ)將細胞係(xì)匹配(pèi)到(dào)供體(tǐ)(如果供體的STR圖(tú)譜(pǔ)是已知(zhī)的(dí)話(huà))或已(yǐ)知(zhī)STR圖(tú)譜的細(xì)胞(bāo)係(xì)。然而,如果特意(yì)從(cóng)同一(yī)供體(tǐ)上建立了兩種(zhǒng)以(yǐ)上細胞係,那麼這兩種細胞(bāo)係(xì)不能(néng)通(tōng)過STR分析來區分(fēn)。由(yóu)於細胞傳(chuán)代(dài)的遺傳漂變,所(suǒ)培(péi)養(yǎng)的細胞的(dí)STR圖譜可(kě)能不(bù)會(huì)與供(gōng)體100%匹(pǐ)配(pèi)。目前的(dí)標準(zhǔn)是(shì)用(yòng)≥80%的(dí)匹配來確認細胞係(xì)的(dí)身份(fèn)[5]。
        有(yǒu)關(guān)這一問(wèn)題(tí)以及使(shǐ)用(yòng)細(xì)胞(bāo)係的推薦做(zuò)法(fǎ)的更多(duō)信(xìn)息,請(qǐng)查看(kàn)細胞係認(rèn)證委員會(ICLAC)的網站。ICLAC提供(gōng)當前(qián)已(yǐ)知被錯(cuò)誤鑒別的細(xì)胞係的索(suǒ)引,該索引現(xiàn)在(zài)列(liè)有(yǒu)488種細(xì)胞係。你還(huán)可以(yǐ)找(zhǎo)到人類(lèi)細胞(bāo)係(xì)STR圖譜(pǔ)數(shù)據(jù)庫的鏈接(jiē)以(yǐ)及關(guān)於此問(wèn)題(tí)的許多其(qí)它的(dí)出版(bǎn)物和網址。