胎(tāi)牛血(xiě)清中(zhōng)蛋(dàn)白組(zǔ)分(fēn)分析(xī)研(yán)究(jiū)

　　胎牛血(xiě)清中蛋白(bái)組分(fēn)分(fēn)析(xī)研究
　　胎(tāi)牛血(xiě)清(qīng)（FetalBovineSerum,FBS）是(shì)在屠(tú)宰懷(huái)孕母(mǔ)牛的(dí)時(shí)候
，通(tōng)過(guò)心髒穿(chuān)刺采取胎牛(niú)血獲取(qǔ)的血(xiě)清
，因其(qí)未(wèi)與(yǔ)外界環(huán)境接觸(chù)
，所以(yǐ)血清內IgG等免疫因子相對(duì)含(hán)量較(jiào)少(shǎo)
，適合用(yòng)於免(miǎn)疫類細胞(bāo)的培養
。
　　1胎牛(niú)血(xiě)清(qīng)與新生(shēng)牛血清，小牛血(xiě)清的區別(bié)簡(jiǎn)介
　　1.1分類與(yǔ)命名
　　目(mù)前國(guó)內對牛(niú)血(xiě)清(qīng)的分類主要(yào)依據(jù)牛出生時間(jiān)和(hé)血(xiě)清采製分(fēn)離(lí)方法命名(míng)
。1，胎牛血(xiě)清(qīng)：八月齡胎(tāi)牛心(xīn)髒穿(chuān)刺取血；2，新生牛血清(qīng)：出生(shēng)14小時以(yǐ)內(nèi)新生牛動脈(mài)采(cǎi)血（又(yòu)可細分為：a.新生(shēng)牛(niú)血清(qīng)：采血(xiě)後靜置(zhì)自(zì)然析(xī)出的血(xiě)清；b.標準新生(shēng)牛血(xiě)清(qīng)：c.經(jīng)離心分(fēn)離(lí)的血(xiě)清；d.普(pǔ)通(tōng)新生(shēng)牛(niú)血(xiě)清(qīng)：融(róng)血(xiě)或微融血的(dí)血清）；3，小牛(niú)血(xiě)清：出生三月齡(líng)小牛動脈采(cǎi)血分離(lí)血清；具(jù)體(tǐ)時間國(guó)內外(wài)分類大致(zhì)相(xiāng)同但略有差(chà)異
，如(rú)國外將小牛(niú)血清(qīng)可(kě)以(yǐ)放(fàng)寬(kuān)至12個(gè)月
。
　　1.2組(zǔ)成成(chéng)分(fēn)
　　這三(sān)種(zhǒng)類(lèi)別(bié)的(dí)血清的主要組成物質
，總(zǒng)體沒有特(tè)別明顯差別(bié)
，隻是有(yǒu)一些成(chéng)分與其生存(cún)環(huán)境(jìng)有關(guān)
，比如
，胎牛(niú)血清(qīng)含有豐富(fù)的(dí)胚(pēi)胎發育過(guò)程中必(bì)須的一些生長因(yīn)子(zǐ)和(hé)激素等
，絕大(dà)部(bù)分的(dí)物質來自於(yú)母(mǔ)體(tǐ)
。而(ér)小牛血清中(zhōng)的含量則很少
，小(xiǎo)牛血(xiě)清(qīng)含在離(lí)開母體後自身產生(shēng)的一些(xiē)代謝(xiè)物(wù)質
，當然也(yě)包括(kuò)一(yī)些生長(cháng)激素
。但(dàn)是(shì)正是(shì)這些細微的(dí)差距(jù)在(zài)培養(yǎng)嬌貴細胞或(huò)要(yào)求苛(kē)刻(kè)的細胞時使得三種(zhǒng)血清表(biǎo)現(xiàn)差距(jù)明顯
。
　　1.3用途(tú)
　　因(yīn)為胎(tāi)牛還(huán)未(wèi)接觸外界
，血(xiě)清(qīng)中(zhōng)所含的(dí)抗體，補(bǔ)體(tǐ)等對細胞(bāo)有(yǒu)害的成(chéng)分zui少
，所以(yǐ)胎牛(niú)血清(qīng)是(shì)品質zui高(gāo)的
，常(cháng)用於(yú)幹(gān)細(xì)胞(bāo)的(dí)培(péi)養；除了如(rú)幹(gān)細胞(bāo)之類的比(bǐ)較嬌貴的細(xì)胞
，其餘(yú)的大(dà)部(bù)分(fēn)細(xì)胞培養
，都(dū)可(kě)以用(yòng)新生牛(niú)血清(qīng)培養
。月齡較(jiào)大的小(xiǎo)牛(niú)血(xiě)清(qīng)相(xiāng)對(duì)培養效果要差一(yī)些(xiē)
，常(cháng)用於(yú)一些易培(péi)養的(dí)細胞或(huò)者腫瘤細(xì)胞(bāo)
，還可(kě)以作為封(fēng)閉(bì)液，保(bǎo)護液(yè)，緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)使(shǐ)用
。使(shǐ)用內蒙古金源康公(gōng)司的(dí)胎(tāi)牛(niú)或者新生牛血清(qīng)對(duì)BHK-21/Vero/Marc145/ST/PK-15等多種細胞進(jìn)行(háng)連續傳(chuán)代培養(yǎng)時
，胎牛(niú)血清(qīng)以(yǐ)及(jí)新(xīn)生(shēng)牛血(xiě)清(qīng)均有(yǒu)較(jiào)好的(dí)促細胞生長(cháng)的效果(guǒ)
，胎(tāi)牛血(xiě)清和(hé)新生(shēng)牛血(xiě)清對(duì)群體性(xìng)細胞培養(yǎng)時(shí)效果(guǒ)差別不明顯
，但(dàn)是對單細(xì)胞克隆培養(yǎng)時胎牛(niú)血清優(yōu)於新生(shēng)牛(niú)血清
。
　　2蛋(dàn)白(bái)組(zǔ)成成分區別
　　2.1血清蛋白組(zǔ)成(chéng)
　　一說起(qǐ)胎牛血清(qīng)與(yǔ)新(xīn)生牛(niú)血清的(dí)差異時
，大家基(jī)本都(dū)會提(tí)到促細胞生(shēng)長(cháng)因子，促(cù)貼(tiē)附因子(zǐ)，激素(sù)及其他活(huó)性物質等(děng)組(zǔ)份與比(bǐ)例不同(tóng)
，這些物質比較(jiào)籠(lóng)統
，且(qiě)與(yǔ)牛源(yuán)地(dì)，生存(cún)環境(jìng)，營養狀況等有一定(dìng)聯係
，研究其差(chà)異(yì)性(xìng)比(bǐ)較困難
。但是有一(yī)點可(kě)以(yǐ)肯定(dìng)
，胎(tāi)牛血清中的部分功能(néng)蛋白與(yǔ)小(xiǎo)牛血清中(zhōng)的含量(liáng)有差(chà)別(bié)
，其中(zhōng)zui主(zhǔ)要的就(jiù)是(shì)球蛋(dàn)白(bái)的含(hán)量有(yǒu)差距
。
　　電(diàn)泳(yǒng)時從正極到負(fù)極為清蛋(dàn)白
，α球蛋(dàn)白
，β-球蛋(dàn)白(bái)及γ-球蛋(dàn)白
。α球(qiú)蛋白包括(kuò)α1-球(qiú)蛋白(bái)
，α2-球(qiú)蛋白(bái)
，β包括β1-球蛋(dàn)白和β2-球(qiú)蛋白(bái)
。α1-球蛋(dàn)白：主要(yào)是(shì)α1抗胰蛋白(bái)酶(méi)和α1酸(suān)性(xìng)糖(táng)蛋(dàn)白(bái)
。α1抗胰(yí)蛋白(bái)酶是(shì)具(jù)有(yǒu)蛋(dàn)白(bái)酶抑(yì)製作用的一(yī)種急性時相反(fǎn)應(yīng)蛋白
，α2-球蛋白主(zhǔ)要為結(jié)合(hé)珠(zhū)蛋(dàn)白和α2-巨球(qiú)蛋(dàn)白
。β-球(qiú)蛋(dàn)白(bái)：以β脂蛋白(bái)，轉(zhuǎn)鐵蛋白(bái)和(hé)血紅素結合蛋(dàn)白為主(zhǔ)
，還包括補(bǔ)體成分(fēn)
。γ-球蛋(dàn)白主(zhǔ)要(yào)成分(fēn)為(wéi)IgG,此(cǐ)外(wài)還包(bāo)括(kuò)IgM;IgA;IgD;IgE等(děng)
。
　　2.1牛(niú)血清(qīng)蛋白(bái)含量差異
　　胎牛血清(qīng)與(yǔ)新生牛血(xiě)清在蛋(dàn)白(bái)組成上的(dí)差異(yì)還是很明顯(xiǎn)的
。首先(xiān)
，根據(jù)內蒙古金源(yuán)康(kāng)生物(wù)工(gōng)程有限公司多年(nián)檢(jiǎn)測經驗總(zǒng)結
，胎牛血清總(zǒng)蛋白含量（g/dl）約(yuē)為2%-4%,新(xīn)生牛血清(qīng)約為3.0%-5.0%,成牛血清則(zé)高(gāo)達(dá)8%-10%.從蛋(dàn)白含量(liáng)上也可以(yǐ)初步判(pàn)斷(duàn)一個(gè)血(xiě)清是否為胎(tāi)牛或新(xīn)生牛血(xiě)清(qīng)
，蛋白含(hán)量越高(gāo)說(shuō)明(míng)牛齡越(yuè)大
，目前檢(jiǎn)測蛋白(bái)含(hán)量(liáng)是(shì)內(nèi)蒙古金(jīn)源康(kāng)生(shēng)物工程有限(xiàn)公司生(shēng)產時初步檢(jiǎn)測一(yī)項重要(yào)指(zhǐ)標(biāo)
。
　　其次(cì)
，球蛋白尤其是免(miǎn)疫球蛋(dàn)白的含量是影響(xiǎng)胎牛(niú)血清與(yǔ)新(xīn)生牛血(xiě)清的(dí)使用(yòng)效(xiào)果的(dí)zui主要(yào)因(yīn)素
。白蛋白是血清中的(dí)重(zhòng)要功能蛋白
，是(shì)血清(qīng)中(zhōng)有益(yì)於細胞(bāo)培養的重要(yào)成分；免疫(yì)球蛋白對細(xì)胞(bāo)培養(yǎng)有(yǒu)一(yī)定的(dí)抑(yì)製(zhì)作(zuò)用
，其(qí)在血(xiě)清中(zhōng)的含量(liáng)越少越好(hǎo)
，通過白(bái)蛋(dàn)白與(yǔ)免疫球蛋(dàn)白的比(bǐ)值(zhí)可以判斷(duàn)血(xiě)清的優劣
。
　　在(zài)成年動物的體液中
，免(miǎn)疫球(qiú)蛋(dàn)白含量zui高的是(shì)血清
。而(ér)正如已經(jīng)知道(dào)的(dí)那樣(yàng)
，母源免疫球(qiú)蛋白不能通過牛的胎(tāi)盤屏(píng)障
，所(suǒ)以(yǐ)胎(tāi)牛(niú)血清中(zhōng)沒(méi)有Ig,小牛從(cóng)初乳(rǔ)中(zhōng)獲得(dé)免疫球蛋白
。正是考慮到這(zhè)一點(diǎn)
，新生牛血清(qīng)來(lái)源於未進食的(dí)新(xīn)生(shēng)牛
，zui大限(xiàn)度(dù)的減(jiǎn)少免疫(yì)球蛋白的(dí)產生
。但是(shì)母(mǔ)牛(niú)有(yǒu)諸如病毒等傳(chuán)染(rǎn)因(yīn)子進入時
，例如(rú)腹瀉病(bìng)毒等感染胎牛
，胎牛(niú)血清(qīng)中(zhōng)可發現(xiàn)免(miǎn)疫(yì)球(qiú)蛋白
，所以(yǐ)胎牛血清不一定(dìng)*不含免疫球蛋(dàn)白
。