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您(nín)現在(zài)的(dí)位置:首頁(yè) > 技(jì)術文(wén)章 > 細(xì)胞培養(yǎng)所需的溫(wēn)度取決於(yú)物(wù)種的(dí)體(tǐ)溫和分離(lí)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)類(lèi)型的(dí)微環境

細胞培養(yǎng)所需的溫度取(qǔ)決(jué)於物(wù)種(zhǒng)的體溫和分離培養細(xì)胞類型(xíng)的微(wēi)環境

  • 發(fā)布(bù)日期(qī):2023-03-23      瀏(liú)覽(lǎn)次數(shù):2624
    •   細(xì)胞(bāo)培養所(suǒ)需(xū)的溫(wēn)度取決於物種(zhǒng)的(dí)體(tǐ)溫和分(fēn)離培(péi)養細胞類型(xíng)的微(wēi)環境。雖(suī)然大(dà)多數人類(lèi)和哺乳(rǔ)動物細(xì)胞(bāo)係在36–37°C下孵育(yù),但(dàn)源(yuán)自冷血動(dòng)物的細(xì)胞(bāo)係可(kě)以(yǐ)在(zài)15°C至26°C之間(jiān)的更(gēng)寬(kuān)溫度範圍內(nèi)維持(chí)。大(dà)多數在(zài)實驗(yàn)室(shì)培(péi)養(yǎng)的人類(lèi)和哺乳動(dòng)物(wù)細胞係(xì)的(dí)pH值(zhí)應嚴格控(kòng)製並(bìng)保持(chí)在(zài)7.2–7.4的生理(lǐ)pH值。相(xiāng)反,一些成纖(xiān)維細胞係(xì)有(yǒu)利於pH7.4和7.7之間稍微(wēi)偏鹼性的條件,而(ér)轉化細胞係更喜(xǐ)歡pH7.0和7.4之間(jiān)的(dí)偏(piān)酸性環境。
        通過(guò)嚴(yán)格(gé)調節和(hé)監測細胞培(péi)養(yǎng)環(huán)境溫度(dù)的(dí)振蕩培養(yǎng)箱,可以實現細胞培養的恒(héng)定溫度(dù)。隨著細(xì)胞(bāo)的繁殖,它們的生長(cháng)需(xū)要在培養基(jī)中提供能(néng)量,例如以葡萄糖(táng)的(dí)形(xíng)式(shì)。代謝時(shí),其副產(chǎn)物包括(kuò)丙(bǐng)酮酸(suān),乳(rǔ)酸(suān)和CO2。大(dà)規模細(xì)胞(bāo)培養時(shí)可(kě)以(yǐ)使用(yòng)乳酸檢(jiǎn)測(cè)儀(yí)進行乳酸(suān)含量(liáng)檢(jiǎn)測(cè)。由(yóu)於pH值取決於(yú)CO2和(hé)HCO3-(碳(tàn)酸(suān)氫鹽)的平衡,因此向(xiàng)細胞培養基(jī)中添加基於(yú)碳酸氫(qīng)鹽(yán)的緩(huǎn)衝液也(yě)可以(yǐ)平衡(héng)CO2濃度(dù)。其他(tā)pH緩衝液可以(yǐ)是有機性(xìng)質(zhì)的,包括(kuò)4-(2-羥乙基)-1-哌嗪(qín)乙(yǐ)磺(huáng)酸(HEPES)(10–25mM)或3-(N-嗎(má)啉代)丙(bǐng)磺酸(MOPS)(20mM)。
        許多細胞培養基含(hán)有(yǒu)pH指示(shì)劑(例(lì)如(rú),酚(fēn)紅),顯示酸性(黃(huáng)色(sè))和鹼性(xìng)(粉紅(hóng)色)條(tiáo)件(jiàn)之間的顏色範圍(wéi)。此(cǐ)外,大(dà)氣中CO2濃度的波動也可(kě)以(yǐ)改變(biàn)pH水平。因此(cǐ),細(xì)胞(bāo)應在培(péi)養箱中培養,該培養箱(xiāng)還允(yǔn)許將(jiāng)CO2張(zhāng)力調(tiáo)整至5–7%。為了延(yán)遲(chí)pH值的變化(huà),可以(yǐ)用(yòng)其(qí)他碳(tàn)源(例(lì)如半(bàn)乳(rǔ)糖(táng)或(huò)果糖)代替(tì)葡萄糖(táng)。雖然這會減(jiǎn)慢細胞生(shēng)長(cháng)的(dí)速(sù)度,但也會(huì)減少乳(rǔ)酸(suān)等(děng)副(fù)產物(wù)的(dí)積(jī)累。對於(yú)在(zài)低(dī)氧(yǎng)張力(lì)(缺氧)下模擬病理或生理條件的(dí)特(tè)定(dìng)細胞培養物,建(jiàn)議使用(yòng)可調(tiáo)節的(dí)1–21%氧濃度與氮氣(qì)平衡的缺(quē)氧培養(yǎng)箱。蘇(sū)州(zhōu)阿爾(ěr)法的(dí)葡(pú)萄(táo)糖乳酸分(fēn)析儀(yí),生物反應器(qì),恒溫恒濕培養箱細胞(bāo)培養搖瓶等廣泛用(yòng)於細(xì)胞培(péi)養。