胎牛血清注意(yì)事(shì)項及細胞(bāo)培(péi)養中如何(hé)防止黑(hēi)點(diǎn)生(shēng)成

　　小牛(niú)血(xiě)清(qīng)和胎牛血清有何區別與(yǔ)注意事項?
　　來源不同(tóng)：胎牛血清(qīng)(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕(yùn)母牛的時候(hòu),通(tōng)過心髒(zàng)穿刺(cì)采血(xiě)獲(huò)取的胎牛的血(xiě)清，新生牛(niú)(小牛(niú))血(xiě)清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天(tiān)的小(xiǎo)牛。
　　組份(fèn)與(yǔ)比(bǐ)例(lì)不(bù)同：兩(liǎng)者所(suǒ)含(hán)的促(cù)細(xì)胞(bāo)生長因(yīn)子(zǐ)
，促貼(tiē)附因子
，激素(sù)及其他(tā)活(huó)性物質(zhì)等(děng)組份(fèn)與比例不同(tóng)，用途與用法不(bù)同：某(mǒu)些細胞(bāo)必需(xū)胎牛(niú)血清才能生(shēng)長，而有些(xiē)細胞(bāo)隻(zhī)需小(xiǎo)牛血(xiě)清(qīng)即可，使(shǐ)用(yòng)濃度(dù)不同，一(yī)般(bān)在5%-10%，有(yǒu)特(tè)殊要求(qiú)的濃度(dù)在20%。
　　血清(qīng)保(bǎo)存(cún)和(hé)使(shǐ)用(yòng)須(xū)注意：血清(qīng)應保存在(zài)-5℃至-20℃，若存放(fàng)在4℃不可超過一(yī)個月(yuè)。解凍血(xiě)清時 ，應先將血清至(zhì)於2-8℃冰(bīng)箱(xiāng)，並經(jīng)常搖匀使之(zhī)溶解，然後(hòu)至室溫放(fàng)置使(shǐ)之升(shēng)溫(wēn)，不可(kě)將冷凍的血清(qīng)直接(jiē)放(fàng)入37℃水(shuǐ)浴(yù)或(huò)者溫(wēn)箱中，如(rú)放在37℃解凍，顏(yán)色(sè)加深，粘稠度也會(huì)增(zēng)加，血(xiě)清(qīng)在解凍和熱滅活後(hòu)，應(yīng)按用量分裝並於(yú)-20℃保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
　　細胞培(péi)養(yǎng)中出(chū)現黑點是汙(wū)染嗎?如何處理(lǐ)?
　　一(yī)旦您在細胞培養的(dí)過程中(zhōng)發現有黑(hēi)點(diǎn)生成，首(shǒu)先(xiān)，要(yào)肉眼觀察培養基(jī)是(shì)否(fǒu)混濁，然後，在(zài)鏡下(xià)觀察(chá)培(péi)養細(xì)胞生長(cháng)的(dí)狀(zhuàng)態，黑點是否(fǒu)遊動。如(rú)果(guǒ)細胞(bāo)被汙染(rǎn)，微生物(wù)則(zé)會(huì)大量(liáng)繁殖，培養基就會迅速變黃
，變(biàn)混濁。汙(wū)染(rǎn)包括細(xì)菌汙(wū)染(rǎn)
，支(zhī)原體(tǐ)汙(wū)染等(děng)。
　　如(rú)果在鏡下觀察(chá)細胞(bāo)，生(shēng)長(cháng)狀態良好，與(yǔ)黑點出(chū)現(xiàn)前相(xiāng)比，沒有任何(hé)變化(huà)，那(nà)麼(mó)，黑(hēi)點(diǎn)的出現可能與以(yǐ)下幾(jī)種(zhǒng)情況有關：
　　(1)細胞生(shēng)長過老(lǎo)，破(pò)碎的(dí)細(xì)胞殘(cán)骸;
　　(2)血(xiě)清質量(liáng)不好(hǎo)，反復(fù)凍(dòng)融(róng)的結果;
　　(3)配製培養基(jī)的(dí)pH值偏高，不宜細胞生(shēng)長(cháng);
　　(4)配製培(péi)養基(jī)的水質
，容器不(bù)合格。可(kě)應用(yòng)離心
，過(guò)濾(lǜ)的(dí)方(fāng)法(fǎ)去除這(zhè)些黑(hēi)點;
　　(5)培養原(yuán)代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點，可能(néng)是原(yuán)代(dài)組織中的雜質，多次(cì)傳(chuán)代可(kě)以消除(chú)。
　　細胞(bāo)培養(yǎng)中(zhōng)如何(hé)防止(zhǐ)黑(hēi)點生(shēng)成?
　　(1) 盡可(kě)能地減少血(xiě)清凍融次數。
　　(2) 培(péi)養基無需37℃水浴(yù)。
　　(3) 培(péi)養基(jī)保持(chí)*佳PH值(zhí)7.0- 7.2。
　　(4) 嚴(yán)格(gé)控製(zhì)配(pèi)製培養基的水(shuǐ)質(zhì)，容(róng)器定期(qī)刷洗。
　　(5) 掌(zhǎng)握(wò)細胞(bāo)傳代的*佳時機，細(xì)胞(bāo)切(qiē)勿生(shēng)長(cháng)過(guò)老。